초록 |
코드링나방(Laspeyresia pomonella), Euzophera pyriella Yang, 복숭아순나방(Grapholitha molesta), 검거세미나방(Black cutworm)은 중국 신장(Xinjiang) fragrant pears(배의 일종) 등 과일에 대하여 위해성이 있는 중요한 해충이다. 그 가운데 코드링나방, Euzophera pyriella Yang, 복숭아순나방은 국제적으로 검험검역하는 중요한 해충이다. 현재 중국에서 주로 해충의 형태 특성에 근거하여 해당 해충을 검정하였고, 분자생물학적 검사 수단이 없었다. 이것은 중국의 fragrant pears 등 과일 생산 및 수출무역의 발전을 제약하였다. 본 논문은 먼저 4종 해충의 16S rDNA COI 유전자 단편을 획득하였다. 그리고 차이적 서열로 특이적 프라이머(specific primers)와 탐침(probes)을 설계하였고, 실시간 형광정량 PCR(real-time fluorescence quantitative PCR) 기술을 이용하여 신속 분자 검출 실험 시스템을 구축하였으며, 표준 곡선에 근거하여 시스템의 반복성과 민감성을 검사하였다. 연구 결과, 코드링나방, Euzophera pyriella Yang, 복숭아순나방, 검거세미나방의 최저 검출한계는 각각 1.605×10 -2 , 0.729×10 -2 , 0.475×10 -2 , 0.818×10 -2 ng/μL였으며, 일반적인 검험검역 요구에 적합하였다. 검출 과정에서 어느 한 해충의 잔기 샘플 혹은 몇가지 해충이 융합된 혼합 샘플이 흔히 나타나는 현상에 대비해 해충의 단일 DNA 샘플, 복합 DNA 샘플 및 4종 해충이 혼합된 DNA 샘플을 이용하여 검출 및 분석을 진행하였으며, 또한 해당 방법의 특이성, 신뢰성 및 적합성을 심층적으로 검증하였다. |