저자(한글) |
YU, Hai-tian,A, Xin-xiang,LIU, Zi-dan,ZHANG, En-lai,TANG, Cui-feng,YANG, Ya-yun,DONG, Chao,ZHANG, Fei-fei,CHEN, Dan,CHEN, Li-juan,DAI, Lu-yuan |
초록 |
벼 흰잎마름병균(Xanthomonas oryzae pv. oryzae)은 이미 식물-병원체 상호작용 모델 연구에 적용되는 병균이 되었다. 단백질체학 방법을 사용하여 흰잎마름병균의 생물학적 특성 및 발병 메커니즘을 깊이 있게 연구할 경우, 세포 내 단백질 추출과 효과적인 분리 방법이 아직 없다는 문제점에 직면한다. 본 논문에서는 TCA-아세톤 침전( TCA-Acetone precipitation ) 방법 및 용해액 침전 방법을 사용하여 흰잎마름병균의 세포 내 단백질을 추출하였으며, 2가지 등전점 전기영동 시스템(IEF I, IEF II)을 이용하여 등전점 전기영동을 진행하였다. 또한, 3가지 단백질의 로딩 농도(loading concentration)(400 μg, 600 μg, 800 μg)를 이용하여 2차원 전기영동을 진행하였다. G-250 염색 후, Imagemaster 소프트웨어를 통하여 2차원 전기영동 스펙트럼을 비교 분석하였다. 연구 결과, 용해액 침전 방법, 등전점 전기영동 시스템II(IEF II) 및 600 μg의 로딩 농도를 결합하는 방법은, 흰잎마름병균 세포 내 단백질을 추출하고 분리하는데 이상적인 방법이고 비교적 좋은 실험 효과를 얻을 수 있었다. 해당 방법의 구축은 흰잎마름병균 단백질체학 연구를 위한 기초를 다졌다. |