저자(한글) |
ZHU, Hai-lin,GONG, Hui,ZHOU, Xiang-ya,YANG, Jin-liang,WEI, Yu-quan,CHEN, Hui-min |
초록 |
목적 : 인간 배아줄기세포(human embryonic stem cells, hESCs)를 배양하는 하나의 새로운 코팅 기질(coating substrate)을 개발하여 hESCs를 더 간편하게 배양하도록 한다. 방법 : 메탄올로 고정한 생쥐 배아 섬유아세포(Mouse embryonic fibroblast, MEF)를 코팅 기질로 하여, 인간 배아줄기세포 품종 X-01을 해당 기질에서 성장하도록 하였으며, 5~6일 간격으로 한번씩 계대배양하였고, 배양 10대 후, 인간 배야줄기세포 특성에 대해 검출하였는데 세포 형태, 알칼리성 포스파타아제 염색(alkaline phosphatase staining), 관련 다기능성 유전자의 발현과 분화 능력을 포함하였다. 결과 : hESCs는 새로운 기질에서 양호하게 성장하였으며, 10차례의 계대 배양 후 여전히 전형적인 hESCs 복제 형태를 유지할 수 있었다. 알칼리성 포스파타아제 염색법으로 검출한 결과, 양성을 나타냈다. 면역형광 염색법으로 검출한 결과, Oct4, SSEA4, Tra-1-60은 양성이며 체외 분화하여 배아와 유사한 세포덩어리(embryoid body)를 형성할 수 있었다. 결론 : 이렇게 고정한 기질로 대량 제조할 수 있고, 장기적으로 보존할 수 있으며, hESCs의 미분화 상태를 장기간 유지할 수 있었다. 또한 인간 배아줄기세포를 체외적으로 증폭하는데 하나의 새로운 경로를 탐색하였다. |