저자(한글) |
HE, Sai,ZHENG, Jian-bao,SUN, Xue-jun,CHEN, Nan-zheng,ZHOU, Pei-hua,WEI, Guang-bing,WANG, Hui,YAO, Jian-feng,ZHANG, Li,JIA, Peng-bo |
초록 |
목적 : 이미 구축한 산소 결핍 반응 인자(hypoxia response element, HRE)와 인간 텔로머라아제 촉매 소단위(human telomerase reverse transcriptase, hTERT) 프로모터(promoter)의 CDX2 유전자 발현 벡터 pLVX-5HRE-hTERTp-CDX2-3FLAG(5HhC)에 대한 조절이 인간 결장암(colon cancer) 세포계 LoVo의 증식에 미치는 영향을 연구하였다. 방법 : 활성화 초기에 선별한 pLVX-hTERTp-CDX2-3FLAG(hC)가 형질전환된 LoVo 세포(hC/LoVo), pLVX-5HREhTERTp-3FLAG(5Hh)가 형질전환된 LoVo 세포(5Hh/LoVo), pLVX-5HRE-hTERTp-CDX2-3FLAG(5HhC)가 형질전환된 LoVo 세포(5HhC/LoVo) 및 무처리 LoVo 세포에 대하여 정상적인 산소 조건 및 산소 결핍(hypoxia) 조건(CoCl 2 첨가)에서 실험을 진행하였다. 그리고 MTT법으로 세포 증식(cell proliferation) 현황을 검사하였으며, 평판 클론 실험으로 세포 군체(cell colony) 형성을 관찰하였고, 유세포 분석법으로 세포 주기를 분석하였다. 결과 : 5HhC가 형질전환된 LoVo 세포 및 각 대조 그룹의 LoVo 세포를 성공적으로 활성화시켰다. hC/LoVo, 5HhC/LoVo 그룹 세포의 증식은 LoVo, 5Hh/LoVo 그룹에 비하여 뚜렷하게 감소되었으며, 또한 산소 결핍 환경에서 5HhC가 LoVo 세포의 증식 속도에 대한 억제 작용은 더욱 뚜렷하였다[5일되었을 때 세포 증식율, 정상적인 산소 조건 vs 산소 결핍 조건: (48.62±3.32)% vs (36.81±2.83)%, P hC/LoVo, 5HhC/LoVo 그룹의 평판 클론수는 LoVo, 5Hh/LoVo 그룹에 비하여 뚜렷하게 적었으며, 또한 산소 결핍 환경에서 5HhC가 LoVo 세포의 군체 형성 기능에 대한 억제 작용은 정상적인 환경 조건에 비하여 더욱 뚜렷하였으며[군체수: (44.2±3.5)개 vs (90.8±9.3)개, P 1 단계 세포 비율은 LoVo 그룹 및 5Hh/LoVo 그룹에 비하여 뚜렷하게 증가되었고[(63.59±0.55)%? (64.82±2.22)% vs (51.38±0.70)%? (51.59±0.38)%, P 1 단계 세포 비율은 더욱 뚜렷하게 증가되었다[(71.38±3.02)% vs (64.82±2.22)%, P 결론 : 치료 벡터 5HhC는 인간 결장암 세포계 LoVo를 G 1 단계에서 억류하였으며, 또한 결장암 세포의 증식 및 군체 형성 기능을 억제하였다. 산소 결핍 조건에서 5HhC의 억제 작용은 더욱 뚜렷하였다. |