Expression, purification and characterization of a novel fatty acid synthase from Rhodosporidium toruloides
기관명 | NDSL |
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저널명 | 生物工程學報 = Chinese journal of biotechnology |
ISSN | 1000-3061, |
ISBN |
저자(한글) | ZHU, Zhi-wei,ZHANG, Su-fang,LIN, Xin-ping,LIU, Wu-jun,ZHAO, Zong-bao |
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저자(영문) | |
소속기관 | |
소속기관(영문) | |
출판인 | |
간행물 번호 | |
발행연도 | 2014-01-01 |
초록 | 지방산 합성효소(Fatty acid synthase, FAS)는 아세틸조효소 A(Acetyl-CoA)와 말로닐코에이 A(Malonyl-CoA) 간 반응에 대한 촉매를 통하여 지방산을 생성함으로서, 유지 합성 대사 경로의 중요한 효소 중 하나이다. 고생산 유지의 로도스포리디움 토룰로이데스(Rhodosporidium toruloides) 내에서 새로운 FAS를 발견하였는데, 두개 서브유닛(sub unit)을 함유하고 있었으며 기타 생물종의 FAS에 비해 독특한 도메인 구성을 가졌다. 특히 두 아실기 운반 단백질(acyl carrier protein, ACP) 도메인을 함유하였다. ACP는 지방산 합성 반응에서 보조 인자의 역할을 한다. 그러므로 ACP가 많으면 FAS 촉매 활성 향상에 유리하다는 것을 추측할 수 있다. FAS의 생물 화학과 구조 특징을 연구하기 위해, FAS 두 서브유닛 발현 벡터를 구축하고 대장간균 Escherichiacoli BL21(DE3)에 형질전환시켰다. pET22b-FAS1과 pET24-FAS2 플라스미드를 함유한 재조합 균주 ZWE06은 두 서브유닛을 동시에 과발현할 수 있다. 황산암모늄 침전, 자당 밀도 구배 원심법과 음이온 교환 크로마토그래피 정제 과정을 통하여 얻은 재조합 FAS의 비활성은 548 mU/mg에 달하였다. 정제된 FAS 복합체는 효소 동역학 및 단백질 구조 연구에 사용될 수 있으며, 발현 및 정제 방법의 구축은 기타 ACP 기능 연구에서 참고적 가치가 있다. |
원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART72193822 |
첨부파일 |
과학기술표준분류 | |
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ICT 기술분류 | |
DDC 분류 | |
주제어 (키워드) | Rhodosporidium toruloides,fatty acid synthase,overexpression,purification,enzyme activity,로도스포리디움 토룰로이데스,지방산 합성효소,과발현,정제,효소 활성 |