저자(한글) |
Zhu, Qidi,Zhang, Xinbo,M, Ejaz,Zhang, Gaisheng,Che, Huixue,Wang, Shuping,Song, Qilu,Yang, Shuling,Zhang, Longyu |
초록 |
세포질적 웅성 불임성(cytoplasmic male sterility)은 밀 잡종이 우세를 이용하는 중요한 방법이다. 3가지 웅성 불임계 밀의 세포질 유형을 알아보기 위해 해당 사립체 DNA를 대상으로 유전자 증폭산물 길이 다형성(Amplified fragment length polymorphism, AFLP) 분석을 진행하였다. 본 논문은 분별 원심분리법(differential centrifugation)과 불연속적 자당 밀도 구배 원심분리법(Discontinuous sucrose density gradient ultracentrifugation)으로 밀 사립체를 추출하고 순화하였다. 연구 결과, 해당 방법으로 얻은 mtDNA의 질량과 순도는 PCR반응 및 유전학 분석에 적합하다. 64쌍의 선택적 증폭 프라이머에서 4쌍의 특이적 프라이머를 선별하였다. 그 중 프라이머 E1/E7은 ms(Kots)-90-110 불임계에서 3개의 특정 밴드를 증폭해내고 프라이머 E4/M2은 ms(Ven)-90-110 불임계에서 2개의 특정 밴드를 증폭해냈으며 프라이머 E7/M6은 ms(S)-90-110 불임계에서 2개의 특정 밴드를 증폭해내고 프라이머 E6/M4은 ms(Kots)-90-110 불임계에서 2개의 특정 밴드를 증폭해냈다. 이러한 특정 프라이머는 Aegilops kotschyi, Ae.ventricosa, Triticum spelta등을 포함한 3가지 불임 세포질 형태의 밀 웅성 불임계 세포질의 분자 표기를 평가하는데 사용할 수 있고, 밀 세포질적 웅성 불임성 메커니즘을 연구하는데 있어 분자 기초를 마련하였다. |