| 저자(한글) |
GUO, Guo,WU, Qin-yi,WU, Jian-wei,FU, Ping,ZHANG, Yong |
| 초록 |
집파리 cDNA 라이브러리 내에서 집파리의 14-3-3(MD14-3-3) 유전자 DNA 서열을 선별하여 확보하였고 이 유전자의 cDNA 라이브러리 플라스미드를 템플릿으로 하여, PCR 기법으로 이 MD14-3-3 유전자를 증폭시켰으며 pET 28a(+)를 벡터로 하여 재조합 플라스미드를 구축하였다. 생물 정보학적 방법을 이용하여 이 유전자 및 그 인코딩한 단백질의 기본적 물리화학적 특성, 소수성, 신호 펩티드, 2차 구조 및 아세포 로컬리제이션(subcellular localization) 등 5가지 방면을 예측하고 분석하였다. 그 결과, MD14-3-3 유전자 ORF의 전체 길이는 771bp였고 인코딩한 아미노산은 257개였으며 이론적 분자량은 29.35kD였다. 그리고 등전점은 5.78였으며 친수성 산성 단백질에 속하였으며 여러개 효소의 결합 부위를 함유하였으며 14-3-3 계통 도메인 및 활성 위치가 있었으며 세포핵 내에서 로컬리제이션하였으며 2차 구조는 주요하게 alpha; 나선 및 불규칙 나사선 구조(random coil)로 조성되었다. PCR법, 2중 효소절단 및 NDA 서열 측정 결과 등 절차를 통하여, pET 28a(+)-MD14-3-3 재조합 플라스미드가 성공적으로 구축되었다는 것을 확인하였다. |
