| 초록 |
Glycolate oxidase는 식물의 광호흡과정에 관여하는 효소 중 하나로서 glycolate를 glyoxylate로 산화시키는 반응을 매개한다. 시금치 glycolate oxidase에 대한 X-ray crystallography 연구에 의하면, histidine 254와 arginine 257이 효소작용에 중요한 역할을 수행하리라 추정된다. 이런 가설을 검증하기 위하여 본 연구에서는 site-directed mutagenesis 방법을 사용하여 이 효소의 histidine 254을 asparagine 또는 tyrosine으로, arginine 257을 serine으로 치환하였다. Wild type에서는 0.125mM의 기질에서도 강한 효소활성이 나타난 반면, mutant들의 경우에는 40mM 기질의 존재하에서도 효소활성이 거의 관측되지 않았다. 본 연구의 실험결과는 histidine 254와 arginine 257이 시금치 glycolate oxidase의 작용기작에 필수적인 아미노산이라는 것을 시사해 준다. |
