| 초록 |
본 연구는 2중 배양법(dual culture method)을 이용하여 바실러스 벨레젠시스(Bacillus velezensis) YB15의 항균 작용을 검증한 기초상에, 투명 원형법(transparent circle)과 DNS법을 이용하여 YB15가 β-글루카나아제(β?glucanase)를 생성하는 특성을 연구하고, 2중 배양법으로 그 효소의 항균 작용을 검증하였으며, PCR 기법을 통하여 목표 유전자를 획득하였다. 또한, 복제 서열을 분석하고 단백질 구조와 기능을 예측하였다. 그 결과, 상기 균주는 여러 가지 병원진균에 대한 길항 작용이 있다. YB15의 Helicobasidium purpureum에 대한 억제대(inhibition zone)는 11.0m이고, YB15의 글루카나아제 조효소액의 Helicobasidium purpureum에 대한 억제대는 10.6mm였다. 이는 글루카나아제가 균주 YB15의 항균 작용에서 중요한 역할을 한다는 것을 설명한다. 서로 다른 접종 방법은 균주 YB15 글루카나아제의 가수분해 투명 원형(hydrolytic transparent circle)의 형성에 영향을 미친다. 점파법(dibbling)을 이용한 가수분해 원형(colony diameter)과 균락 직경(colony diameter)의 비율은 72시간에 14.1에 달했고, 효과가 가장 좋았다. 복제하여 획득한 균주 YB15의 글루카나아제 유전자를 Bglu1로 명명하였다. 상기 유전자의 서열 길이는 732bp이고, 243개의 아미노산을 코딩하며, 단백질 아미노산은 B. amyloliquefaciens TB2의 β-1, 3-1, 4-글루카나아제와 상동성이 비교적 높았고, 당류 가수분해효소-16 패밀리에 속했다. N 말단 소수성 도메인은 신호 펩티드가 존재하며 막관통 도메인(transmembrance domain)이 있다. Bglu1을 분비 단백질(secretory proteins)로 추정한다. |
