저자(한글) |
FENG, Xiao-jiao,BU, Chun-ya,SHI, Guang-lu,GAO, Pin,WANG, You-nian,PENG, Bo,LI, Jin-ling,HAN, Jing-yu |
초록 |
아세틸콜린에스테라제(acetylcholinesterase, AChE)는 유기인(organophosphorus)과 카르바메이트계 살충제(carbamic insecticide)의 주요 타겟이다. 점박이응애붙이(Tetranychus cinnabarinus)의 AChE를 타겟으로 하는 살비제(acaricide) 체외 선별 시스템을 구축하고자, 본 연구는 점박이응애붙이의 AChE 유전자를 복제하고 그 특성을 분석하였다. 상동유전자 클로닝 및 RACE 기술로 유전자를 복제하고 형광정량 PCR로 그 발현 특성을 분석하였다. 분석 결과, 점박이응애붙이 AChE의 cDNA 서열 길이는 2,512 bp이고, 그중 개방해독틀(ORF)은 2,064 bp이며, 687개 아미노산을 코딩하고, N말단에 신호펩타이드가 있으며, 이어맞추기 자리(Splice site)는 메티오닌(Methionine)으로부터 시작된 74-75개 아미노산 잔기 사이에 있고, C말단에 당 에스테르(sugar ester) 정착 구조가 있으며 GenBank 등록번호는 AGI96546.1이다. 서열 분석 결과, 점박이응애붙이는 기타 응애목(Acarina)의 AChE와 높은 상동성을 갖고 있었으며, 특히 같은 속인 잎응애속의 점박이응애(Tetranychus urticae) AChE와의 상동성이 가장 높았다. 그러나 아미노산 서열 비교 분석 결과, 양자 효소의 촉매특성은 차이가 존재할 수 있었다. 점박이응애붙이 서로 다른 발육기 AChE의 전사 수준에 대한 비교 분석 결과, 유충기의 발현량이 가장 높았고, 또한 유충기부터 발현량은 점진적으로 감소하기 시작하여 성충기에 가장 낮았다. 본 연구 결과, 점박이응애붙이와 점박이응애의 ace 1은 비교적 높은 상동성이 있었으나, 효소 특성은 차이가 존재하였다. 점박이응애붙이 서로 다른 발육시기 ace 1 유전자 발현수준의 다른점은 서로 다른 발육시기 진드기의 습성 및 대사특성과 관계가 있다. |