| 초록 |
식물 생물 반응기(plant bioreactor)를 이용하여 응용 가치를 갖는 약용 단백질을 발현시키는 것은 최근 생물기술 연구의 이슈이다. 본 연구에서는 PCR 기술을 이용하여 감자 유전체로부터 그 잎 조직 특이성 프로모터 Prbcs를 클론한 후, PLACE 등 데이터베이스를 이용하여 서열에 대해 프로모터 구성요소 분석을 진행하였다. 중첩 PCR, 제한효소 절단, 체외 연결, 전환 등 기술을 이용하고 바이너리 벡터(binary vector) pCambia-2301을 골격으로 하여 Prbcs로 구동된 약용 단백질 인간 인터류킨-12(hIL12)의 발현 벡터를 구축하였다. 연구 결과, 본 연구는 감자 유전체로부터 623 bp 크기의 프로모터 단편을 증폭하여 얻었다. 또 서열 분석 결과를 통하여 해당 단편이 TATA-box 등 전형적인 프로모터 구성요소 및 일부분 조직 특이성 관련 반응 구성요소를 함유하고 조직 특이성 프로모터의 특징에 적합한 것을 밝혔다. 그리고 pCambia-2301 기반의 Prbcs 구동 hIL12 식물 발현 벡터를 성공적으로 얻었다. 본 연구에서 얻은 Ppatatin 프로모터 및 구동된 hIL12 발현 벡터는 hIL12가 식물 생물 반응기에서의 발현량을 향상시키고 감자 생물 반응기를 최적화하는데 기초를 마련하였다. |
