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논문 기본정보

Expression and enzyme activity of Sulfolobus virus dUTPase gene

논문 개요

기관명, 저널명, ISSN, ISBN 으로 구성된 논문 개요 표입니다.
기관명 NDSL
저널명 應用與環境生物學報 = Chinese journal of applied and environmental biology
ISSN 1006-687x,
ISBN

논문저자 및 소속기관 정보

저자, 소속기관, 출판인, 간행물 번호, 발행연도, 초록, 원문UR, 첨부파일 순으로 구성된 논문저자 및 소속기관 정보표입니다
저자(한글) ZHU, Guo-dong,WEI, Yun-lin,ZHANG, Qi,JI, Xiu-ling,LIN, Lian-bing
저자(영문)
소속기관
소속기관(영문)
출판인
간행물 번호
발행연도 2014-01-01
초록 Sulfolobus virus STSV2 dUTP pyrophosphatase(dUTPase) 유전자에 대해 복제 및 발현하고 그 효소학적 특성을 분석하였다. STSV2의 dUTPase 유전자 서열에 근거하여 특이성 프라이머를 설계하였으며, 바이러스 STSV2 DNA를 템플릿으로 PCR 증폭을 진행하였다. 산물을 원핵 발현 벡터 pET32a(+)에 복제하였으며, 다음 이를 Escherichia coli BL21(DE3)에 전환시켜 dUTPase의 IPTG 유도 발현 및 정화를 진행하였다. SDS-PAGE를 통하여 크기를 검출하였고 또 그 효소 활성을 측정하였다. 측정 결과, 유도 발현한 재조합 dUTPase 단백질 분자량(M r )은 약 38×10 3 (pET32a(+) 자체의 가용화 태그를 포함)이었으며, Mg 2+ 이 존재하는 경우에 재조합 dUTPase는 dUTP에 특이성 촉매작용을 하여 dUMP와 PPi를 생성할 수 있고, 그 반응 최적 온도는 60℃이며, pH값이 3-8 사이일 때 비교적 높은 활성이 있다. 또한 PCR 증폭 효과와 특이성을 향상시키는 분야에서 일정한 작용을 갖고 있다. 본 연구는 복제 발현을 통하여 Sulfolobus virus STSV2 dUTPase를 얻었으며, 유전자 증폭 분야에서 일정한 응용적 가치를 갖고 있다.
원문URL http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART71559359
첨부파일

추가정보

과학기술표준분류, ICT 기술분류,DDC 분류,주제어 (키워드) 순으로 구성된 추가정보표입니다
과학기술표준분류
ICT 기술분류
DDC 분류
주제어 (키워드) Sulfolobus virus,dUTP pyrophosphatase,PCR amplification efficiency,prokaryotic expression,enzymatic activity,Sulfolobus virus,dUTP pyrophosphatase,PCR 증폭 효과,원핵 발현,효소 활성