저자(한글) |
SHEN, Yan,LIU, Wei,ZHAN, Yao-yao,HUANG, Xian-ya,MU, Lin-lin,XU, Lei,DING, Jun,CHANG, Ya-qing |
초록 |
큰 가리비(Patinopecten yessoensis)의 생식선, 폐각근 단백질의 2차원 전기영동 시스템을 구축하여, 서로 다른 등전위 응집(isoelectro focusing) 시간이 큰 가리비 생식선, 폐각근 단백질의 2차원 전기영동 결과에 미치는 영향을 비교 분석하였다. 또한, 상기 2차원 전기영동 시스템을 이용하여 생식선과 폐각근의 가용성 총 단백질을 분리하고, 컴퓨터 영상 분석 소프트웨어를 이용하여 큰가리비의 생식선과 폐각근 단백질의 2차원 전기영동도를 검측 분석하였다. 실험 결과, 세포 초음파처리(ultrasonication)-아세톤 침전(acetone sedimentate)?50 mmol/L Tris-HCl (pH6.8), 1000V, 3 h 등전위 응집, 12% SDS-PAGE 및 고감도의 은 암모니아 염색을 통하여 해상도가 높고 중복성이 좋은 2차원 전기영동도를 획득할 수 있었다. PDQuest8.0 영상 분석 소프트웨어를 이용한 검측 분석 결과, pH5~8 조건에서, 큰 가리비 생식선과 폐각근 조직의 단백질은 주로 pH5~7에 분포되었고, 상대적 분자 질량은 97~20.1 ku이었으며, 2차원 전기영동도로 검출한 생식선 조직의 단백질 반점수는 265개였고, 폐각근 조직의 단백질 반점수는 161개였다. 연구 결과, 큰 가리비의 생식선, 폐각근의 가용성 단백질 발현 스펙트럼은 각각의 특징이 있었으며, 생신선 조직의 가용성 단백질 종류는 폐각근 조직보다 풍부하였다. 본 연구의 실험 결과는 큰 가리비의 단백질체학과 기능 유전체학을 심층 연구하기 위한 이론적 기초를 마련하였다. |