| 저자(한글) |
CEN, Wei-jian,CHENG, Chun-yan,YANG, Li-chao,WANG, Lin,JIANG, Bo-le |
| 초록 |
단백질체학 기술을 사용하여 십자화과 검은썩음병균(Xanthomonas campestris pv.campestris 8004, Xcc 8004)의 분비 단백질을 감정하기 위하여, 본 논문에서는 Xcc 8004 분비 단백질에 적합한 2차원 전기영동 기술two-dimensional electrophoresis, 2-DE)을 구축하였다. 먼저, 분비 단백질의 유도 능력, 단백질 추출 방법 및 샘플 부하량(loading amount) 등 측면에서 MME와 XCM2 2가지 배양기가 2-DE에 미치는 영향을 비교하였다. 비교 결과, XCM2 배양기가 Xcc 8004 분비 단백질에 대한 유도 능력은 MME보다 강하였다. TCA/아세톤(acetone) 방법을 사용하여 단백질을 침전시켜 얻은 2차원 전기영동 지도는 배경이 선명하고 해상도가 높았다. 또한, 각각 400 μg, 300 μg, 250 μg,150 μg의 부하량을 사용하여 2차원 전기영동을 진행한 결과, 부하량이 250~300 μg일 경우(IPG pH 3~10, 24 cm), 전기영동 지도의 해상도는 가장 높았다. 결론적으로, XCM2 배양기는 Xcc 8004 분비 단백질의 유도에 더 적합하였다. TCA/아세톤 방법은 분비 단백질 추출에 비교적 뛰어난 방법이고 비교적 적당한 부하량은 250~300 μg였다. |
