| 저자(한글) |
SHI, Li-ming,LU, Qun-feng,YANG, Yan-yan,SHANG, Jin-jie,CHEN, Bao-shan |
| 저자(영문) |
|
| 소속기관 |
|
| 소속기관(영문) |
|
| 출판인 |
|
| 간행물 번호 |
|
| 발행연도 |
2014-01-01 |
| 초록 |
최근에 이분자 형광 상보 기법(bimolecular fluorescence complementation)은 이미 생체 내 단백질 상호작용 연구에 광범위하게 적용되었다. 밤나무 줄기마름병균(Cryphonectria parasitica)에 적합한 생체 내 단백질 상호작용 검사 체계를 구축하기 위하여, 본 논문에서는 플라스미드 pCPXHY 2 와 pCPXG418을 골격으로, 밤나무 줄기마름병균 pgd 촉진제가 통제하고 강화형 황색 형광단백질 EYFP를 리포터 유전자로 하며, 하이그로마이신(hygromycin)과 G418 저항성을 선발 마커로 하는 이중 플라스미드 시스템 pCPXHY 2 N155와 pCPXG418C156을 구축하였다. 플라스미드 pCPXHY 2 N155는 EYFP의 1~155번째 아미노산 잔기(residue)의 코딩 서열을 가졌으며, pCPXG418C156은 EYFP 유전자의 156~239번째 아미노산 잔기의 코딩 서열을 가졌다. 해당 플라스미드 시스템의 유효성을 입증하기 위하여 밤나무 줄기마름병균 이종 삼합체(Heterologous trimer) G 단백질의 β와 γ 서브유닛 유전자를 각각 pCPXHY 2 N155 위의 N155와 pCPXG418C156 위의 C156을 연결시켰으며, 이로써 재조합 플라스미드 pCPXHY 2 N155β와 pCPXG418C156γ를 얻었다. 또한, 이 두 개 재조합 플라스미드를 밤나무 줄기마름병균 야생형 균주 EP155에서 동시 형질전환(cotransformation) 시켰다. 형질전환 균주에서 뚜렷한 황색 형광을 관찰하였기 때문에 Gβ와 Gγ가 세포에서 상호작용이 발생하는 것을 밝혔다. 본 연구에서 구축한 이분자 형광 상보 시스템은 앞으로 밤나무 줄기마름병균의 분자 상호작용을 연구하는 데 새로운 기술적 수단을 제공하였다. |
| 원문URL |
http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART75845608 |
| 첨부파일 |
|
