| 저자(한글) |
WANG, Shu-li,CHEN, Li,TANG, Man,FU, Min,DU, Yue,HUANG, Yan,PAN, Li-chao,LIU, Qiu-yun |
| 초록 |
목적: Ras/Raf 대사 경로는 암 발생과 밀접히 연관된어 있지만, 해당 경로를 대상으로 하는 약물은 아직 많지 않다. 방법: 두개의 역방향 하이브리드 시스템(Reverse two hybrid assay)과 무작위 펩타이드 라이브러리(random peptide library)를 결합하여, Ras-Raf의 상호 작용을 간섭하는 올리고 펩티드(oligopeptide)에 대한 분리 작업을 진행한다. 우선 벡터와 키메라 유전자 라이브러리(chimeric gene library)를 구축하고, 다음에 효모에 대한 전기 펄스를 진행한다. 추가로 양성 복제에 대한 시퀸싱 작업을 진행한다. 결과: 이 중에서 펩티드-6 EGPSGN은 네거티브 선발 배지(Negative selection medium)에서의 효모 성장에 일정한 촉진 역할을 하였다. 2게의 펩티드-8인 TIARGPFE과 FEGPSGNS은 0.4 mmol/L의 경우, 그 항암 역할은 세크로핀(cecropin) 및 선배 과학자에 의해 보고된 Ras-Raf 상호작용을 간섭하는 펩티드보다 조금 높았는데, 세크로핀에 비해서 2%, 후자에 비해서 10% 높았다. 결론: 글리세린(glycerin, 3%)/갈락토오스(galactose, 4%) 선발배지는 효과가 뛰어났고, 양성 복제를 분리해냈다. 하지만 앞선 연구자에 의해 건립된 라피노오스(raffinose)/갈락토오스 선발배지는 본 실험에서 효력이 없었다. 해당 전략은 Gal7 돌연변이에 기반한 경제적인 두개의 역방향 하이브리드 시스템의 응용범위를 넓힐 수 있었다. |
