Development of a Tetracycline Inducible and Highly Efficient Expression System of Single Plasmid Mode
기관명 | NDSL |
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저널명 | 中國生物化學與分子生物學報 = Chinese journal of biochemistry and molecular biology |
ISSN | 1007-7626, |
ISBN |
저자(한글) | MA, Zhuo,QIAO, Xian-Feng,ZHENG, Xin-Min,ZHOU, Jing-Rong,LIU, Xi-Mei,XU, Li,BI, Yan-Zhen |
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저자(영문) | |
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출판인 | |
간행물 번호 | |
발행연도 | 2012-01-01 |
초록 | 현존하고 있는 테트라사이클린 유도 제어 시스템(tetracycline-inducible gene regulation system)은 두 개의 분리 된 플라스미드를 기반으로 각기 트랜스 결합 단백질과 외래 유전자를 발현하도록 한다. 이러한 결함은 유전자 변형 정량 발현 동물 모델을 구축할 때 두 동물 계통의 준비와 유지를 필요로 하고 이런 경우 교배할 때 이중 유전자 변형 후세대를 얻을 수 있기 때문에 절차가 복잡하고 난이도가 비교적 크다. 상술한 결함에 대비하여 본 연구는 트랜스 단백질 rtTA 발현 카세트와 낮은 배경 응답 요소 Ptight 를 같은 캐리어에 조립하여 견고한 단일 캐리어 모드의 유도 발현 시스템 pTRE-Tight-rtTA를 구축하였으며 두개의 보고유전자 발현으로 그 제어 활성을 연구한다. 루시퍼와 녹색 형광 단백질을 함유한 pTRE-Tight-rtTA-Luc와 pTRE-Tight-rtTA-EGFP 리포터 캐리어는 각기 돼지의 신장 PK15 세포를 형질 전환하였고 강한 독시사이클린(doxycycline) 처리를 하였다. 결과적으로, 모두 리포터 유전자의 정량적 발현을 성공적으로 유도할 수 있었다. 같은 몰비율(molar ratio)을 갖는 형질 조건에서 단일 캐리어 시스템의 유도 효율은 이중 캐리어 시스템보다 현저하게 높다는 것을 알 수 있다(Dox-1 000 ng, 10배; Dox-10 000 ng, 8배). 본 유도형 단일 캐리어 시스템의 구축은 외래 유전자의 정량 발현의 개발에 새로운 수단을 제공하며 유전자 변형 정량 발현 동물 모델의 연구에 새로운 전략을 제공할 것이다. |
원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART65649391 |
첨부파일 |
과학기술표준분류 | |
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ICT 기술분류 | |
DDC 분류 | |
주제어 (키워드) | Tet-on,single-plasmid,inducible,reporter gene,tetracycline,Tet-on,단일 캐리어,유도,리포터 유전자,테트라사이클린 |