Gene expression profiling and polyclonal antibody preparation of the transcription factor c-Myc in the brain of diapause and non-diapause pupae of the cotton bollworm, Helicoverpa armigera(Lepidoptera: Noctuiadae)
기관명 | NDSL |
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저널명 | 昆蟲學報 = Acta entomologica Sinica |
ISSN | 0454-6296, |
ISBN |
저자(한글) | CHEN, Wei,XU, Wei-hua |
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저자(영문) | |
소속기관 | |
소속기관(영문) | |
출판인 | |
간행물 번호 | |
발행연도 | 2015-01-01 |
초록 | [목적] c-Myc는 최근 몇 년 동안에 많이 연구된 전사인자이다. 또한 Wnt/β-catenin 신호경로의 조절을 받는 중요한 표적이다. 본 연구는 왕담배나방(Helicoverpa armigera)의 c-Myc 유전자를 복제하고 휴면, 비휴면 번데기 뇌에서 c-myc의 발현 상황을 핵산 수준에서 예비 연구하는 한편 c-myc 단백질의 다중 클론 항체를 제조하는데 목적이 있다. [기법] RACE 방법을 사용하여 왕담배나방 c-myc 유전자의 cDNA를 복제하고 RT-PCR 방법을 사용하여 휴면, 비휴면 번데기 뇌에서 Har-c-myc 유전자의 발현 상황을 비교한다. 획득한 서열에 근거하여 원핵 발현 벡터를 구축한 다음 대장균(Escherichia coli)에서 발현시킨다. 정제 후 뉴질랜드 토끼에 면역을 하고 다중 클론 항체를 제조한다. [결과] 왕담배나방 c-myc 유전자를 복제하였다. 핵산 수준에서 연구한 결과, 휴면 번데기 뇌에서 c-myc의 발현 수준은 비휴면 번데기 뇌에 비해 뚜렷하게 낮았다. 대장균에서 c-Myc의 부분적 펩타이드를 성공적으로 발현시켰고 니켈 컬럼(Ni column)으로 정제하여 순도가 높은 재조합 단백질을 획득하였다. 제조한 c-Myc 항체의 역가는 1:125,000에 도달하였다. [결론] 휴면 번데기 뇌에서 Har-c-myc의 발현은 하향 조절되었다. 왕담배나방 c-Myc 다중 클론 항체를 획득하였다. 본 연구 성과는 왕담배나방 발육 과정에서 Wnt/β-catenin 신호경로의 작용과 관련한 후속적 심층 연구에 기초를 마련하였다. |
원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART72415515 |
첨부파일 |
과학기술표준분류 | |
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ICT 기술분류 | |
DDC 분류 | |
주제어 (키워드) | Helicoverpa aimigera,diapause,transcription factor,c-Myc,polyclonal antibody,Wnt/β-catenin signaling pathway,왕담배나방,휴면,전사인자,C-Myc,다중 클론 항체,Wnt/β-catenin 신호경로 |