| 초록 |
본 논문에서는 재조합 대장균 E-coli BL21(pET22b-paⅠ) 내로 부터 Erwinia rhapontici NX-5 유래의 수크로오스 이소메라아제(sucrose isomerase,SIase,EC 5.4.99.11)를 정제하여 확보한 다음, 순수한 효소를 대상으로, 그 효소 활성의 억제 반응 속도를 고찰하였다. 그 결과, 순수한 SIase의 비활성은 1512.77U/mg이었고 미카엘리스-멘텐 상수 K m 및 V max 는 각각 260mmol/L 및 39.41μmol/(L·s)였다. 화학 억제제 우드워드시약 K(Woodward′s Reagent K, WRK)로 재조합 수크로오스 이소메라아제에 대하여 억제 반응을 반응 체계에서 WRK 농도의 증가에 따라 SIase와 기질 수크로오스의 친화력 상수 K m 는 더 증가되었으며 최대 반응 속도 V max 는 일정한 범위 내에서 안정을 유지하였다. SIase에 대한 억제 반응 속도를 분석한 결과, WRK의 SIase에 대한 억제 유형은 가역적인 경쟁적 억제였으며, 이는 WRK와 수크로오스의 구조가 유사하고 경쟁할 수 있는 SIase의 활성 중심이 결합되는 것과 상관성이 있을 것으로 본다. |
