| 초록 |
【목적】남극의 진흙 토양에서 1주의 프로테아제를 대량 생산하는 방사균(actinobacterium)을 분리하고 생산된 프로테아제를 정제하여 특수 성질을 지닌 효소산물을 얻고자 한다. 【방법】XE-1에 대한 생리생화학적 분석과 16S rRNA 유전자 서열 분석을 통하여, Streptomyces griseorubens의 변종임을 초보적으로 확인하였다. 에탄올 침전법, 이온 교환, 젤(gel) 크로마토그래피 등 기법을 이용하여 정제한 후, 동결건조 및 농축을 이용하여 그 세포외 프로테아제를 얻었으며, SDSPAGE를 이용하여 분자량을 측정하고 그 성질 특성을 반영하였다. 【결과】고농도의 유기용매, 변성제, 산화제에 대한 내성을 갖추고 겉보기 분자량이 14 kDa인 알칼리 세린 프로테아제를 얻었으며, 심층 분석 결과, 최적의 pH는 8.2, 온도는 55℃, 미카엘리스 상수(Michaelis constant) K m 과 V max 은 각각 1.9 mg/mL, 973 u/mL였다. 해당 프로테아제의 활성은 25%의 유기용매에서 50%-180%의 초기 활성을 보였다. 다양한 농도의 산화제에서 110%-140%의 초기 활성을 보였으며, 0.2 mol/L-4 mol/L의 변성제에서 100%-150%의 초기 활성을 보였다. 【결론】남극 해양 스트렙토미세스(Streptomyces) XE-1에서 유기용매, 변성제, 산화제 내성을 갖춘 크기가 약 14 kDa인 알칼리 프로테아제를 분리하였는데, 그 특수한 효소학적 성질은 산업 생산 혹은 약학 등 분야에 응용될 수 있다. |
