| 저자(한글) |
ZHANG, Jie,LI, Zhao-Jie,WANG, Yu,ZHANG, Hui-Yuan,LU, Lin,WANG, Jing,LIU, Yan,GU, De-Zhou,WANG, Qi,ZHANG, Xin,WANG, Pei-Rong,YUE, Jia-Chang,CHEN, Guang-Quan |
| 초록 |
[목적] 분자 모터기술에 기반한 간편하고 신속한 분자 유형 방법을 구축하여, 독성을 가진 유전자와 가지지 않은 유전자의 장염비브리오균(Vibrio parahaemolyticus)에 대한 신속한 분류를 하는 것이다. [기법] F0F1-ATPase를 핵심으로 분자 모터를 구축하였으며, 장염비브리오균의 독성 유전자 tdh, trh와 종 특이성 유전자 tlh, toxR를 목적 유전자로 4개 탐침을 설계하였다. 비오틴-아비딘(Biotin-avidin) 시스템으로 탐침과 분자 모터를 연결시켜 F0F1-ATPase 분자 모터 바이오센서(Biosensor)를 구축하였으며, 10주의 장염비브리오균 분리 균주에 대한 분류를 진행하여 PCR-전기영동-겔 영상 결과와 비교하였다. 동시에 바이오센서의 예민성과 특이성 검출을 연구하였다. [결과] 10주의 실험균주 중에서 10주(ten strains)는 양성 tdh(carrying tdh)이고, 0주(none)는 양성 trh(carrying trh)이며, 10주의 균은 모두 tlh와 toxR를 가지고 있었고, PCR-전기영동-겔 영상 결과와 일치하였다. 분자 모터 바이오센서의 최저 검출 한계는 1pg/반응 시스템이며, 장염비브리오균의 특이성에 대해 식별할 수 있었다. 또한 PCR-전기영동-겔 영상 방법의 최저검출 한계는 10pg/PCR 반응 시스템이다. [결론] 분자 모터에 기반한 분자 유형 방법을 구축하였으며, 장염비브리오균의 발병성에 대해 신속한 진단을 진행할 수 있었고, 또 검출한 예민성은 PCR-전기영동-겔 영상 방법보다 10배 높았으며 특이성도 매우 높았다. 해당 방법은 간편 신속하며 시간과 노동을 절약하여 지방의 질병제어 부서와 검사 및 검역 부서의 저층 실험실에서 장염비브리오균 검출과 유행병학 추적 업무에 적용되었다. |
