저자(한글) |
ZHANG, Chao,LV, Shu-Xia,YU, Xiao-Dan,MA, Di,HAO, Le-You |
초록 |
[목적] 표면 활성제 Sodium deoxycholate(SD)와 Ethidium bromide monoazide(EMA)-PCR 반응시스템을 결합하여 SD-EMA-PCR로 장염비브리오균(Vibrio parahaemolyticus)의 산 세포와 죽은 세포를 식별하는 검출 방법을 구축하였다. [기법] 검출 시스템 중에서 추가한 SD 최적 농도, EMA 구분의 산 세포와 죽은 세포 DNA의 농도 범위, EMA 활성화 광분해(Activation photolysis) 최적 노출 시간 등에 대하여 순서대로 최적화하였다. SD-EMA-PCR 방법을 확정하여 장염비브리오균의 산 세포와 죽은 세포의 혼합 시스템 중에서 활성세포의 최저 검출 한계를 검출하였다. [결과] SD 농도 le;0.5 g/L, EMA 농도 3.2-34.0mg/L, 노출시간 25분일 때 SD-EMA-PCR 검출 시스템은 죽은 세포 DNA 증폭에만 억제작용을 하였다. SD-EMA-PCR로 검출한 활균 세포의 최저 검출 한계는 10CFU/mL이다. [결론] 산 세포와 죽은 세포 혼합 시스템의 SD-EMA-PCR검출은 해당 방법이 EMA-PCR 점검에서 누락된 죽은 균의 검출결과에 미치는 영향을 현저하게 감소시켰다는 것을 증명하였으며, 식품매개 질병(foodborne illness)균의 검출 중에서 산 세포와 죽은 세포의 식별 방법을 완벽하게 하여 효과적인 방법을 제공하였다. |