| 초록 |
배아 줄기세포(embryonic stem cells, ESCs)는 자가 재생 및 다중 분화의 특성을 가지고 있다. 최근 연구하는 microRNAs(miRNAs) 조절을 포함한 전사 후 조절이 ESC 심근세포 분화(ESC-derived cardiomyocytes, ESCM)의 운명 결정에 중요한 역할을 하는 것으로 나타났다. 그러나 ESC 분화 운명을 결정하는 miRNAs에 대한 이해가 아직 부족하다. miRNAs의 심근세포 분화에 대한 조절 작용을 한층 더 이해하기 위하여, 본 연구에서는 전통적인 현적법(hanging drop method)을 이용하여 쥐 ESC(mouse ESCs, mESC)를 유도하여 심근세포로 분화하게 하였으며, 애질런트(Agilent) 8×15 k의 쥐 miRNAs 칩(miRbase V16.0)을 이용하여 심근세포의 고동(뛰는) 영역과 고동하지 않은 영역의 miRNAs 발현 프로파일(expression profile) 차이점을 비교하였다. 이로써 고동하지 않은 영역보다 고동 영역에서는 19개 miRNAs가 5배 이상의 발현 변화를 발생하였다(n=3, P 정량 RT-PCR을 이용하여 miRNAs 칩 중에 차이 배수가 10보다 큰 miRNAs를 추가적으로 분석하였다. 이로써 miR-196a, miR-196b와 miR-467e는 심근세포 고동 영역(beating area)에서의 발현 풍부 정도(abundance)가 고동하지 않는 영역보다 뚜렷이 낮았다(n=3, P Target Scan 데이터베이스를 사용하여 miR-196a와 miR-196b에 표적 유전자 예측을 진행한 결과, miR-196a와 miR-196b는 심근세포 분화와 부(-)적 상관관계를 나타낼 수 있어 ESC 분화 운명 결정에 일정한 조절 역할을 할 수 있는 것을 보여줬다. 위 결과는 miRNAs가 ESC로부터 분화된 심근세포에서의 역할을 한층 더 확인하는데 새로운 경로를 마련하였다. |
