Expression and characterization of an alkaline esterase from marine Acinetobacter sp.
기관명 | NDSL |
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저널명 | 微生物學通報 = Microbiology |
ISSN | 0253-2654, |
ISBN |
저자(한글) | ZHANG, Qiu-fang,LI, Ren-kuan,LIN, Juan,YE, Xiu-yun |
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저자(영문) | |
소속기관 | |
소속기관(영문) | |
출판인 | |
간행물 번호 | |
발행연도 | 2014-01-01 |
초록 | [목적] 전복(abalone) 내장 중의 아시네토박터(Acinetobacter sp.) 에스테라아제 유전자 estA를 클론하며 재조합 발현 및 성질 연구를 진행한다. [기법] 분자 생물학 기술을 이용하여 에스테라아제 유전자 estA를 클론하고 pPICZα-C-estA 재조합 발현 벡터를 구축하며 전기충격 형질전환(electro transformation) 방법으로 재조합 플라스미드(plasmid)를 피치아 효모(Pichia pastoris) X33으로 전입한다. 메탄올로 재조합 균주를 유도 배양하여 재조합 에스테라아제를 얻으며 재조합 에스테라아제를 생화학적으로 표현한다. [결과] 클론하여 얻은 estA 유전자 서열 전체 길이는 912bp이고 304개의 아미노산을 코딩하였다. 재조합 X33 발효 상청액(supernatant) 가운데 에스테라아제 활성은 1,200U/L에 도달하고 재조합 에스테라아제의 분자량은 약 33.7kD였다. 효소 성질 연구 결과, 재조합 에스테라아제 촉매 기질이 니트로벤젠 아세트산에틸(nitrobenzene ethyl acetate)에 대한 가수분해 반응의 최적 pH와 온도는 8.0, 40℃이었다. 그리고 pH 값이 8.0~10.0, 온도가 60℃ 이하일 때 비교적 좋은 안정성을 가지고 있다. [결론] 해양에서 유래한 아시네토박터 에스테라아제 유전자를 성공적으로 클론하여 피치아 효모 가운데서 고효율 발현을 실현한다. |
원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART75840209 |
첨부파일 |
과학기술표준분류 | |
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ICT 기술분류 | |
DDC 분류 | |
주제어 (키워드) | Acinetobacter,Esterase,Pichia pastoris,Clone and expression,아시네토박터,에스테라아제,피치아 효모,클론 발현 |