| 저자(한글) |
ZHAO, Qing-liang,YANG, Su-fang,LIANG, Tian,ZHANG, Dian-qing,YANG, Xia,SHENG, Jin-liang |
| 초록 |
본 논문은 아나플라즈마 파고사이토필리움(anaplasma phagocytophilum) msp4 단백질의 항원성(antigenicity)을 분석 및 예측하였고, 또한 생물정보학적 분석으로 아나플라즈마 파고사이토필리움 msp4 단백질의 2차 구조(secondary structure), 친수성(hydrophilicity), 소수성(hydrophicity), B 세포 선형 항원결정부위(bepipred linear epitope)를 분석하였다. 그리고 분석하여 얻은 지배적 항원결정부위에서 유전자 합성을 진행한 후 pET32a 발현 벡터에 서브 클로닝(subcloning)하였고, 대장균(Escherichia coli)에서 재조합 단백질을 획득하였다. 생물정보학적 분석 결과, msp4 단백질은 283개 아미노산으로 조성되었고, 분자량이 29.8 ku, 이론 등전점(isoelectric point)이 6.05, 불안정 계수(instablility coefficient)가 32.79, 총 평균 소수성이 0.063이었으며, 2차 구조를 예측한 결과, msp4 단백질은 주로 불규칙 코일(random coils) 구조, 확대 사슬(extended strands) 구조, 알파-나선(alpha helixes) 구조였으며, B 세포 항원결정부위를 예측한 결과, msp4 단백질에는 14개의 선형 항원결정부위가 있었다. 분석 결과에 근거하여 msp4 단백질과 친수성이 높은 세포막 외부(membrane outside) 영역의 28~158 위치 서열을 pET32a에 클론하여 원핵 발현을 진행한 결과, 34 ku 위치에서 표적 단백질이 발현되었다. 본 논문에서는 성공적으로 아나플라즈마 파고사이토필리움의 msp4 단백질을 원핵 발현 및 정제하였다. 이것은 아나플라즈마 파고사이토필리움으로 인한 질환을 혈청학적으로 검사하는 방법을 구축하는데 물질적 기초를 마련하였다. |
