저자(한글) |
SUN, Ming-zhe,CUI, Na,SUN, Xiao-li,XIAO, Jia-lei,LV, De-kang,ZHU, Yan-ming |
초록 |
마이크로 RNA(miRNA)는 식물의 여러 가지 스트레스에 대한 반응에서 중요한 작용을 한다. 초기 연구에서 본 연구실은 유전자 칩 기술을 통하여 벼의 저온 스트레스 miRNA 유전자 발현 스펙트럼을 구축하였으며, 저온 스트레스에 의해 유도 발현되는 Os-miR1435와 Os-miR535 두 개 miRNA 유전자를 선별하여 얻었다. Os-miR1435 유전자에 대해 본 연구에서는 먼저 USERTM 기술을 이용하여 식물의 과발현 벡터를 구축하였고, 아그로박테리움 매개 형질전환(agrobacterium-mediated transformation) 방법을 이용하여 벼 유합 조직을 감염시켰으며, 이로써 형질전환 벼 품종을 얻었다. 야생형과 형질전환 벼의 생장 발육과 농업 형질을 비교하여 Os-miR1435 유전자의 과발현이 형질전환 벼의 결실률(seed setting rate)을 줄이는 것을 발견하였다. 야생형과 형질전환 벼의 발아기와 유묘기(seedling stage) 저온 스트레스 처리 표현형을 비교하여, Os-miR1435 유전자가 저온 스트레스 처리에서 볍씨의 발아와 유묘 생장에 영향을 미치지 않는 것을 밝혔다. 더 나아가 psRNATarget 소프트웨어를 이용하여 Os-miR1435의 표적 유전자를 예측하였으며, Real-time PCR 방법을 이용하여 야생형과 형질전환 식물 중 표적 유전자 발현량의 차이를 분석하였고 표적 유전자에 대한 진화 분석을 진행하였다. 본 연구에서는 Os-miR1435의 생물학적 기능을 한층 더 깊이 연구하는데 중요한 기초를 다졌다. |