저자(한글) |
ZHU, Li,WANG, Xue-bin,SHI, Hao,YU, Hui-qing,LU, Ping,Xu, xu-jun,CHENG, Guo-xiang |
초록 |
조직 절편 배양법(tissue explants adherent method), 트립신 격차소화법을 사용하여 인간 라이소자임(hLYZ) 형질전환 산양의 유선 상피세포를 분리하고, 형질전환 양의 유선 상피세포(TGMEC) 체외 배양계를 구축하였다. 그리고 해당 생장과 체외 분비 특성을 분석하였다. 연구 결과, 체외 생장 곡선은 대표적인 S형에 부합되었으며, 계대(passage) 기간의 2배체 염색체수가 정상이었다; 면역 형광염색, RT-PCR 분석법을 통하여 이 세포에서 상피세포의 특유한 각 단백질 18을 발현하며, 내인성 유즙 단백질(milk protein)(카세인과 락토글로불린)을 발현한다는 것을 발견하였다; 효소결합 면역실험 결과, 유선 상피세포는 체외 배양 가운데서 재조합 인간 라이소자임을 지속하여 안정적으로 분비한다는 것을 발견하였다. 이 과정을 통하여 얻은 인간 라이소자임 형질전환 양의 상피세포계는 유선 생물반응기를 연구하는데 중요한 세포막형태를 제공하였다. |