| 저자(한글) |
Deng, Haixia,Zhao, Zixia,Xu, Peng,Li, Yan,Wang, Shu,Sun, Xiaowen |
| 초록 |
본 논문에서는 거울잉어(Cyprinus carpio var.specularis) 특수 유전자 서열의 염색체 매핑(chromosome mapping)에 이용되는 실험 시스템을 구축하기 위하여, 박테리아 인공 염색체(Bacterial artificial chromosome) 베이스에서 짧은 서열의 유전자 조각을 선택하여 PCR기법으로 증폭한 후, 표적 서열이 들어있는 BAC 클론을 선별하였다. BAC 플라스미드(plasmid)를 추출한 후 틈 번역(nick translation)을 통하여, 제자리 형광 잡종화(Fluorescence in situ hybridization) 탐침(probe)을 제조하였다. 염색체 조각 전처리, BAC 플라스미드 탐침 제조, C 0 t-1 DNA 폐쇄 게놈의 반복 서열, prehybridization, 형광 염료 선택, 신호 확대 등 일련의 실험 조건과 기법을 최적화하여, 유사 분열 중기에 거울잉어 표적 서열의 염색체 매핑을 실현하였다. 매핑 대상으로는 염색체상 위치가 하나인 서열(예를 들면 제브라피쉬의 microsatellite 마커인 Z6884과 Z4268), 염색체상 위치가 여러 개인 반복 서열(예를 들면 Yellow River carp의 성별 관련 마커인 CCmf1)이 있었다. 제브라피쉬에서 분리한 동일한 염색체상의 2개 microsatellite 마커를 각각 거울잉어의 서로 다른 염색체에 매핑하여 염색체 진화 연구에 접적인 실험적 의거를 제공하였다. 동시에 기존의 유전 연쇄 지도와 염색체를 대조하여, 염색체 식별과 세포 유전학 지도 구축에 근거를 제공하였다. Yellow River carp의 성별 관련 반복 서열은 4개 염색체보다 많은 염색체를 매핑하여 성별 결정 관련 유전자의 선별에 근거를 제공하였다. BAC-FISH 실험 시스템은 거울잉어의 세포 유전학 지도 구축, 게놈 진화, 비교 게놈학 연구에 도움이 될 것이다. |
