| 저자(한글) |
LV, Chun-rong,XIONG, Hui,GONG, Xue-lian,GUAN, Wei-jun,MA, Yue-hui |
| 초록 |
본 논문에서는 베이징 오리(Beijing duck) 표피 줄기세포(epidermal stem cells, ESCs)의 분리 배양법을 구축하여 그 생물학적 특성을 연구하였다. 실험은 우선, 조직편 부착법 및 효소 소화법을 이용하여 베이징 오리의 표피 줄기세포을 분리하였으며 또한 면역조직화학법을 통하여 분리된 줄기세포를 검사함으로써 세포 사멸 검사와 외생 유전자의 형질전환 연구를 진행하였다. 그 결과, 세포는 부착 성장형(adherent growth type)이었고 체적이 작으며 핵/세포질비가 높으며, 현미경 내에서 굴절성이 강하면서 가시화 셀 형태 특성을 가졌다. 면역조직화학법을 통하여 베이징 오리의 ESCs를 확인한 결과, ESCs는 beta;1 integrin과 K19를 표현하였으나 K10을 표현하지 않았다. 세포 사멸을 검사한 결과, 사멸된 ESCs는 아주 적었으며 세포의 사멸율은 6.5%밖에 안되었다. 그 다음으로, 형광 단백질 유전자(플라스미드 pEGFP-N3, pEYFP-N1 및 pDsRed-N1 등)를 베이징 오리 ESCs 내에 형질주입하였으며 형질주입된 후 48-96h 동안 양성 세포는 뚜렷이 많아졌으며 그 강도는 더 증가하였다. 특히 형질주입한 후 48h일 때, 양성 세포는 가장 많았으며 형질주입율은 최고로 56%에까지 도달할 수 있었다. 형질주입된 세포의 형태 및 성장 속도는 뚜렷한 변화가 없었고 형질주입된 형광 단백질의 종류는 다양하였으며 또한 형질주입 효율은 조금 차이를 보였다. 그 결과, 체외 배양한 세포는 표피 줄기세포였으며 그 사망율이 낮아서 외생 유전자의 형질주입을 연구하는데 이용할 수 있었다. |
