| 저자(한글) |
Wang, Jiajia,Sun, Lixin,Sun, Lichao,Mo, Wenxiu,Yu, Long,Yang, Zhihua,Liu, Qian,Ran, Yuliang |
| 초록 |
목적 : 인간 위암 세포계 SNU-5(gastric cancer cell line SNU -5) 중 종양 줄기세포를 분리 및 감정을 하고, 인간 위암 CD90 + 줄기세포가 인간 위암의 전이와 예후에 미치는 영향을 연구하는 것이다. 방법 : 무혈청 현탁배양(non-adherent culture) 및 PKH26 염색법으로 SNU-5 세포계 중 종양줄기세포의 존재여부를 확정하고, 유세포 분석(flow cytometry analysis)으로 친연 SNU-5(parent SNU-5) 및 구상세포(sphere cells) 중 종양줄기세포 표지물의 발현을 분석하였다. 그리고 CD90 + SNU-5세포를 선별하여 생체외 생물학적 특성을 연구하였으며, 또한 SCID 생쥐에 대한 암 유발 실험을 진행하였다. 종양병원 복부외과에서 95건의 위암환자 종양의 병리샘플을 수집한 후, 면역조직화학법(immunohistochemistry)으로 위암조직 중 CD90의 발현을 검사하였다. 결과 : SNU-5세포를 무혈청 현탁 배양액에서 11일 배양 후, 형성된 구상세포 중 하나의 PKH26 양성세포(positive cell)가 존재하였다. 무혈청 현탁 배양은 CD90 + SNU-5세포를 6.1배 농축시킬 수 있으며, 또한 CD90은 구상세포 중 줄기세포의 PKH26과 공동염색(co-stained) 된다. CD90 + SNU-5세포는 CD90 - SNU-5세포와 친연 SNU-5세포에 비하여 더욱 높은 자기재생 기능(self-renewal ability) [성공율 (7.7±1.1)% vs (1.3±0.4)%, (1.8±0.3)%, P lt;0.01]과 침입기능[침입세포수(283.3±30.2) vs (48.0±7.5), (156.7±7.2), P lt;0.01]이 있다. CD90 + SNU-5세포를 중증복합면역결핍증(severe combined immunodeficiency, SCID) 생쥐의 피하에 2×10 2 개 접종하면 6주(weeks) 후 암을 초래할 수 있지만(1/6), 2×10 4 개의 CD90 - SNU-5세포를 접종하면 10주 후에 암을 초래할 수 있다(1/6). 95명의 위암환자의 조직 중 CD90의 발현은 위암의 먼거리 전이와 뚜렷한 관련성이 있으며(P lt;0.01), 또한 CD90양성 위암환자(CD90 positive gastric cancer patients)의 생존기간은 CD90 음성 환자(CD90 negative patients)보다 뚜렷하게 짧다(P lt;0.01). 결론 : 인간위암세포계 SNU-5 중에는 자기재생 및 침입기능이 우수한 CD90 + 줄기세포가 존재하며, 인간 위암 조직 중 CD90 + 줄기세포 수량은 종양의 전이와 환자의 생존기간과 뚜렷한 관련성이 있다. |
