| 저자(한글) |
XU, Zheng-zhong,SHAN, Fa,SHAN, Feng-li,MENG, Chuang,JIE, Xiao-li,LIU, Jia-ying,MIN, Jing-jing,CHEN, Xiang,JIAO, Xin-an |
| 초록 |
본 연구에서는 소 감마인터페론(bovine interferon-gamma) ELISPOT 검사법을 구축하여 소결핵병(bovine tuberculosis) 검사에서의 사용 가치를 평가하였다. 천연 소의 감마인터페론과 특이적 결합하는 단일 크론 항체를 각각 코팅 항체(coating antibody)와 검사 항체로 사용하고 서로 다른 실험 조건으로 최적의 코팅 항체 농도, 최적의 세포 수량과 최적의 검사 항체 농도 등을 탐색하는 것을 통하여, 소 감마인터페론 ELISPOT 검사법을 구축하였다. 30마리 젖소의 미정맥(caudal vein) 혈액을 수집하여 그의 말초혈액 단핵세포를 분리하였다. 투베르쿨론(Tuberculin)을 자극원으로 하고 ELISPOT 검사법을 이용하여 소결핵병을 검사한 후, BOVIGAM TM ELISA 시약 키트를 이용한 검사 결과와 비교하였다. 천연 소 감마인터페론과 특징적 결합하는 단일 항체 2G5와 5E11를 선별하였다. ELISPOT 검사법의 최적 실험 조건을 확인하였다. 즉 코팅 항체 2G5의 농도 2.5μg/mL, 각 기공별 세포 수량은 2.5×10 5 개, 검사 항체 Bio-5E11의 농도가 1μg/mL이다. ELISPOT 검사법과 BOVIGAM TM ELISA 시약 키트를 이용한 검사법을 동시에 사용하여 30마리의 젖소를 검사하였다. 그 결과 BOVIGAM TM ELISA 시약 키트를 이용한 검사 결과를 표준으로 할 때, BOVIGAM TM ELISA 시약 키트를 이용하여 검사한 14마리의 양성(+) 소 가운데서 ELISPOT 검사법으로 11마리의 양성 소를 검출하였다. 즉 민감성이 78.6%(11/14)이다; BOVIGAM TM ELISA 시약 키트를 이용하여 16마리의 음성(-) 소를 검사한 가운데서 ELISPOT 검사법으로 12마리의 음성 소를 검사하였다. 즉 특이성이 75%(12/16)이다. 투베르쿨론을 자극원으로 하는 소결핵 감마인터페론 ELISPOT 검사법을 소결핵병(bovine tuberculosis)의 보조적 검사에 활용할 수 있다. 즉 잠재적인 임상적 응용 가치가 있다. |
