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논문 기본정보
Expression,Purification and Biological Activity of Escherichia coli RecQ Helicase
논문 개요
| 기관명 | NDSL |
|---|---|
| 저널명 | 中國生物工程雜誌 = Journal of Chinese biotechnology |
| ISSN | 1671-8135, |
| ISBN |
논문저자 및 소속기관 정보
| 저자(한글) | HUANG, Zhen-rong,WU, Hai-li,ZHANG, San-jun,DU, Bing,QIAN, Min,REN, Hua |
|---|---|
| 저자(영문) | |
| 소속기관 | |
| 소속기관(영문) | |
| 출판인 | |
| 간행물 번호 | |
| 발행연도 | 2013-01-01 |
| 초록 | RecQ 헬리카제(RecQ helicases)는 생체분자 대사과정에서 중요한 대분자 물질이며 유전물질의 안정성을 유지하는데 있어서 중요한 작용을 한다. PCR에서 E.coli DH5 alpha;균주의 게놈에서 E.coli RecQ 유전자를 증폭 및 원핵발현 캐리어 pET24a(+)에 클로닝한다. 또한 대장균 E.coli BL21(DE3)를 형질전환, IPTG를 유도발현한다. 목표단백질은 주요하게 용해형식으로 균체에 존재한다. 발현조건 최적화후 Ni컬럼 킬레이트 친화성 크로마토그래피(nickel-chelate affinity chromatography column)로 정화하여 순도가 90%이상인 목표단백질을 얻었다. 생화학 및 생물물리학 기술을 응용하여 E.coli RecQ 헬리카제의 생물학적 활성을 연구한다. 그 결과 E.coli RecQ 헬리카제는 DNA 의존성 및 단백질 농도 의존성의 ATP 가수분해 활성이 있다. 같은 단백질 농도에서 E.coli RecQ 헬리카제 결합 DNA 활성강약의 순서는 두갈래 dsDNA, ssDNA, 평활말단 dsDNA이다. 또한 ATP 의존의 dsDNA 융화활성 및 시간의존의 DNA 어닐링 활성이 있다. 이 실험은 RecQ 헬리카제 패밀리의 기타 중요한 구성원들의 활성기능 연구에 있어서 이론적 근거와 정보를 제공하였다. |
| 원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART66520750 |
| 첨부파일 |
추가정보
| 과학기술표준분류 | |
|---|---|
| ICT 기술분류 | |
| DDC 분류 | |
| 주제어 (키워드) | RecQ helicases,Protein expression,Protein purification,Biological activity,RecQ 헬리카제,단백질발현,단백질 정화,생물학적 활성 |