| 저자(한글) |
XU, Yang-yu,WEN, Shi-jie,LI, Hai-fen,LI, Ling,LIANG, Xuan-qiang |
| 초록 |
TvALP 유전자와 TvRBL 유전자 사이에 1개 구간의 유연쇄(flexible chain) 유전자 서열을 첨가하여 융합 유전자(fusion gene)를 구축하였다. 생물정보학적 분석 결과, 해당 융합 유전자에는 1개 구간의 신호 펩타이드(signal peptide) 서열이 포함되어 있었다. RT-PCR 기술로 트리코더마 비리디(Trichoderma viride) 균사체의 총 RNA에서 TvRBL 유전자, TvALP 유전자와 및 신호 펩타이드가 제거된 ΔTvALP 유전자를 증폭하여 각각 원핵 발현 벡터 pET30a에 클론하여 재조합 플라스미드 pET30a-TvALP-linker-TvRBL와 pET30a-ΔTvALP-linker-TvRBL를 구축하여 대장균 BL21(DE3)pLysS에 전환한 후 이소프로필티오-β-D-갈락토시드(isopropylthio-β-D-galactoside, IPTG)로 유도발현하였다, SDS-PAGE 전기영동 분석 결과, 신호 펩타이드가 제거된 pET30a-ΔTvALP-linker-TvRBL는 대장균 BL21(DE3)pLysS에서 발현하였고, 60 kD인 위치에 1가닥의 단백질을 갖는 특이적 밴드가 있었으며, 예측한 표적 산물의 단백질 밴드와 크기가 일치하였다. |
