| 초록 |
VP110는 새우 백점병 바이러스(white spot syndrome virus, WSSV)의 외막 단백질이다. 유사성 분석 결과, VP110는 곤충 DNA 바이러스의 주요 경구 감염 인자(oral infection factor) PIF2와 상동성이 있었으며, 또한 상동성 영역은 주로 N 말단의 150~600aa에 위치하였다. 상술한 2종 바이러스는 N 말단의 앞부분에 1개의 막관통 영역(transmembrane domain)을 포함하고 있었다. VP110의 N말단 보존 영역 기능을 연구하기 위해 VP110의N 말단 유전자(Svp110, 450~1,830 bp)를 pET-16b 및 pGEX-4T1 원핵 발현(prokaryotic expression) 벡터에 클론하였으며, 동시에 대장균 BL21(DE3), Rosetta2 균주에서 발현 조건을 최적화하여 VP110의 N 말단 단백질(sVP110) 발현을 유도하였다. 실험 결과, 재조합 플라스미드 pET-16b-Svp110는 37℃, 1mmol/L IPTG 조건에서 발현되었지만 16℃에서 발현량이 아주 낮았다. 그러나 재조합 플라스미드 pGEX-4T1-Svp110는 16℃에서 고발현하였다. Rosetta2 균주의 발현량은 BL21(DE3)에 비하여 높았다. 연구 결과, Rosetta2 균주를 WSSV 구조 단백질의 발현에 이용하는 것이 더욱 적합하였고, VP110이 서로 다른 벡터에서 발현은 온도가 미치는 영향을 받았다. VP110의 N 말단 단백질 발현은 VP110의 기능을 연구하는데 기초를 마련하였다. |
