| 저자(한글) |
GAO, Xing-jie,ZHANG, Yi,SONG, Juan,FU, Xue,SU, Chao,ZHANG, Gui-min,ZHANG, Chun-yan,YU, Lin,YAO, Zhi,YANG, Jie |
| 초록 |
인간 내원성 SND1(staphylococcal nuclease domain containing 1) 단백질은 N 말단의 SN(staphylococcalnucleases) 도메인과 C 말단의 TSN(Tudor-SN5) 도메인으로 구성되었다. 그 중 SN 도메인은 SN1~SN4 4개 중복 기능 단편을 포함한다. 본 과제 그룹의 기존에 실행한 연구 결과에 의하면, SND1 단백질은 SN 도메인을 통하여 G3BP(Ras-GAP SH3 domain-binding protein) 단백질과 상호 결합하여 세포 스트레스 과립(stressgranules, SGs) 형성에 공동 참여한다. SGs는 진핵 세포가 산화 스트레스, 바이러스 감염 등 외부 자극을 받았을 때, 세포질 내에서 형성된 RNA 대사 관련의 과립 형태 구조이다. SGs의 성분 감정 및 상호 작용에 대한 분석은 학자들의 연구 중점이다. 본 연구에서 면역 공동 침강 실험 결과, 항 SND1 항체는 HeLa 세포 내 다른 중요한 스트레스 관련 인간 항원 R(humanantigen R, HuR) 단백질을 침강해낼 수 있다. 이밖에 지질체 형질전환법을 이용하여 pcDNA3-FLAG-HuR 재조합 플라스미드를 HeLa 세포 내에 순간 형질전환하여 외인성 FLAG-HuR 융합 단백질을 성공적으로 발현하였다. 그리고 항 FLAG 마커 항체는 또 반대방향으로 내인성 SND1 단백질을 공동 침강할 수 있다. 해당 결론은 SND1과 HuR 간에 단백질 상호 결합 작용이 존재한다는 것을 증명한다. 세포 면역 형광법으로 검증한 결과, HeLa 세포에 0.5 mmol/L 아비산나트륨(Sodium arsenite) 산화 스트레스 자극을 주었을 때, SND1과 HuR 단백질이 세포질의 SGs 구조에서 공동으로 위치배정되었다. GST-pulldown 실험 결과는 절단된 SN 도메인은 HuR 단백질과 결할할 수 있으며, 그 중 SN1 기능성 단편의 결합 능력이 가장 강하다는 것을 설명한다. 이는 SND1 단백질이 SN 도메인과 HuR 단백질을 통하여 스트레스 복합물을 형성하며 SGs의 세포질 조립에 참여한다는 것을 알려준다. SGs에 위치배정 되지 않은 TSN 도메인도 HuR 단백질과 결합할 수 있다. 이는 SND1-HuR의 단백질 상호 작용이 SGs에만 국한되지 않고 기타 방면의 기능에 대해서도 의의가 있다는 것을 설명한다. |
