초록 |
본 논문에서는 물푸레나무(ashtree) 게놈 DNA를 양식으로 하고 SiteFinding-PCR 방법을 이용하여 리듬 유전자 LHY (late elongated hypocotyl)의 프로모터서열을 증폭하였는데 길이는 1,360 bp이다. PLACE 프로모터 예측 도구로 분석한 결과, 서열에는 전사에 반드시 필요한 TATA box, CAAT box 및 일부 비생물적 스트레스와 호르몬 반응 요소 등이 함유되어 있다. 식물 GFP의 일과성 발현(transient expression) 벡터 pPXGFP-P-LHY를 구축하였으며 Agrobacterium tumefaciens으로 담배 잎사귀와 자작나무 현탁 세포를 유도 형질전환하고 GFP 측정한 결과, LHY 프로모터는 GFP 유전자가 담배와 자작나무 세포 내에서의 발현을 가동시킬 수 있으며 비생물적 스트레스(저온, 고온, 염) 반응한다. 식물의 GUS 리포팅 유전자 통합 발현 벡터 pPCXGUS-P-LHY를 구축하고 Agrobacterium tumefaciens 유도법으로 담배를 일시적으로 형질전환하고 GUS 염색한 결과, LHY 프로모터의 활성은 다양한 정도의 시공간적 특징을 갖고 있다. |