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논문 기본정보
Cloning and Expression Analysis of Nucleocapsid Protein-encoding Gene(N) from Porcine Transmissible gastroenteritis virus(TGEV) Fujian Strain
논문 개요
| 기관명 | NDSL |
|---|---|
| 저널명 | 農業生物技術學報 = Journal of agricultural biotechnology |
| ISSN | 1674-7968, |
| ISBN |
논문저자 및 소속기관 정보
| 저자(한글) | Wang, Shao,Zhu, Xiaoli,Zhu, Xiaolin,Chen, Shaoying,Lin, Fengqiang,Chen, Shilong,Cheng, Xiaoxia,Li, Zhaolong,Jiang, Bin |
|---|---|
| 저자(영문) | |
| 소속기관 | |
| 소속기관(영문) | |
| 출판인 | |
| 간행물 번호 | |
| 발행연도 | 2013-01-01 |
| 초록 | 돼지 전염성 위장염(swine transmissible gastroenteritis, TGE)은 한가지 전염성이 높은 장 관련 전염병인데 중국의 법정 검역 전염병이다. 중국 푸?성 돼지 전염성 위장염 바이러스(Transmissible gastroenteritis virus, TGEV) 뉴클레오캡시드 유전자(N)의 분자 특성 및 그 원핵 발현 산물의 항원성을 연구하기 위하여 GenBank에서의 TGEV 전체 유전자 시퀀스를 참조하여 한쌍의 증폭 TGEV 푸?(FJ) 스트레인 N 유전자의 특이성 프라이머를 합성 디자인하고 복제와 시퀀스 분석을 진행하였는데 결론적으로 TGEV-FJ 스트레인 N 유전자의 전체 길이는 1149bp이고 382개의 아미노산(GenBank 등록 번호 JQ700302)을 인코딩하였으며 국내외 23그루 TGEVN 유전자의 뉴클레오티드와 유사성이 있음을 설명하고 아미노산의유사성을 비교 분석 하였는데 N 유전자 뉴클레오티드의 유사성은 95.4%~99.8%였고 아미노산의 유사성은 96.1%~100%였다. TGEV-FJ 스트레인 N 유전자를 원핵 발현 벡터 pET-32a에 복제하고 동시에 대장균(Escherichia coli) Rosetta(DE3)에 전환하여 발현을 진행한다. SDS-PAGE 분석은 재조합 단백질은 약 68kD이고 예상 분자량과 일치하였다. Western blot 분석은 재조합 단백질은 항 TGEV 양성 혈청과 반응하여 특이성 밴드가 출현할 수 있음을 설명한다. 정제한 재조합 TGEVN 단백질을 코팅 항원으로하여 구축한 간접 ELISA 항체 검측 방법은 훌륭한 특이성을 가지고 있고 20몫의 돼지(Sus scrofa) TGEV 양성 혈청 샘플에서 16몫의 양성 결과를 검측했고 10몫의 음성 혈청 샘플에서 9몫의 음성 결과를 검측했다. 정제한 TGEV 재조합 N 단백질을 이용하여 Balb/c 생쥐가 면역력을 가지게 하고 하이브리도마 기술로 단일 클론 항체를 제조하였으며 1그루의 특이성이 훌륭하고 또한 항 TGEVN 단백질을 안정적으로 분비할 수 있는 단일 클론 항체의 하이브리도마 세포주(1-27로 명명)를 얻었으며 간접 면역 형광 시험으로 단일 클론 항체는 TGEV 전체 바이러스 항원을 특정적으로 식별할 수 있음을 증명하였다. TGEVN 단백질의 단일 클론 항체 제조는 TGEV 면역학의 검측 방법 구축을 위하여 기본 자료를 제공한다. |
| 원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART66522449 |
| 첨부파일 |
추가정보
| 과학기술표준분류 | |
|---|---|
| ICT 기술분류 | |
| DDC 분류 | |
| 주제어 (키워드) | Porcine,Transmissible gastroenteritis virus (TGEV),TGEV-Fujian (FJ) strain,Nucleocapsid (N),N gene,Prokaryotic expression,돼지,전염성 위장염 바이러스(TGEV),TGEV-푸?(Fujian) 스트레인,뉴클레오캡시드,N 유전자,원핵 발현 |