저자(한글) |
WANG, Wei,WU, Xu-gan,LOU, Bao,XU, Lei,LIU, Zhi-jun,CHENG, Yong-xu |
초록 |
본 연구에서는 전사체 서열 분석 및 RACE 기술을 통하여 포르투누스 트리투버큘라투스(Portunus trituberculatus)로부터 레티노이드 X 수용체(retinoid X receptor, PtRXR2) 유전자의 완전한 cDNA를 클로닝하였다. 그리고 형광 정량 PCR(qRT-PCR) 기술을 통하여 이 유전자가 포르투누스 트리투버큘라투스의 다양한 조직 및 다양한 탈피 단계에서의 발현 상황을 연구하였다. 그 결과, (1) PtRXR2 유전자 cDNA의 전체 길이는 1718bp였고 이 유전자 서열에는 141bp인 5' 비암호화 영역(5'-UTR), 209bp인 3'-UTR 및 1368bp인 개방해독틀이 포함되어 있었으며 암호화된 아미노산은 455개였고 예측 분자량 및 등전점은 49.75kDa 및 6.79였다. (2) PtRXR2로 아미노산 서열을 유도해 낸 Blastp 결과로부터 PtRXR2는 이미 알고 있는 갑각류 동물의 RXR와 74%―99%의 일치성이 있다는 것을 알수 있다. 계통수 분석을 통하여 확인한 결과, PtRXR2는 기타 갑각류 동물의 RXR와 같은 갈래에 있었다. (3) qRT-PCR 분석 결과, C 단계에서 PtRXR2가 Y 기관, 아가미, 눈자루 및 하악 기관 내에서의 발현 수준은 비교적 높았지만 간췌장 내에서의 발현 수준은 가장 낮았다. 기타 6개 조직 내에서의 발현은 중간 정도 수준이었다. (4) 다양한 탈피 단계에 있어, PtRXR2가 Y 기관, 눈자루 및 흉신경에서의 발현 수준은 AB단계에서 가장 높은 반면 E 단계에서 가장 낮았는데 이는 상술한 기관의 세포 증식이 주로 AB 단계에서 발생되는 것과 상관성이 있을 것으로 보인다. 근육에서의 발현 수준은 AB 단계 및 C 단계에서 비교적 높은 반면 E 및 D 단계에서 가장 낮았는데 이는 근육의 성장 및 영양 물질이 주로 이 두 단계에서 발생되는 것과 상관성이 있을 것으로 보인다. PtRXR2가 간췌장에서의 발현 수준은 AB 단계에서 가장 높은 반면 C 단계에서 가장 낮았는데 이는 PtRXR2가 주로 간췌장의 상피세포 증식 및 분화에 참여할 뿐, C 단계의 영양 대사 조절에는 결정적인 작용을 일으키지 않는다는 것을 제시한다. |