| 초록 |
해녀콩(Canavalia lineata)잎에서 ornithine carbamoyltransferase(OCTase)를 부분정제 하여 canavanine대사와 연관된 일부성질과 효소활성의 세포내 분포를 조사하였다. 이 효소는 황산스트 토마이신 침전, ammonium sulfate 분획, DEAE-Sephacel 이온교환 크로마토그래피, 그리고 Sephacryl S-300 겔 크로마토그래피를 거쳐 정제한 결과 purification fold는 81.7이고 회수율은 6%이었으며 분자량은 120 kD로 산출되었고 활성의 최적 pH는 인산완충액의 경우 7.8이었다. 한편, 이 효소는 ornithine과 carbamoyl phosohate로부터 citrulline을 합성할 뿐만 아니라 canaline과 carbamoyl phosphate를 기지로 이용하여 ureidohomoserine을 합성할 수 있었다. 그리고 20mM carbamoyl phosphate일 때 ornithine에 대한 $K_m$ 은 14.1 mM이며 canaline에 대한 $K_m$ 은 5.5 mM이었고, 20mM ornithine일 때 carbamoyl phosphate에 대한 $K_m$ 은 10.6 mM으로 나타났다. OCTase 활성의 세포내 분포를 분별 원심분리와 Percoll 밀도구배법으로 조사한 결과 효소활성은 시토졸 분획(140,000 g 상등액)에 전체효소활성 중 61%가 집중되었고, 엽록체에서는 활성의 일부가 검출되었으나 미토콘드리아에서는 검출되지 않았다. |
