| 초록 |
본 논문에서는 NaCl 스트레스에서 내성을 갖는 pYES2-Salix linearistipularis cDNA-효모균을 선별하는 연구를 하였다. 먼저 클론을 통하여 Salix linearistipularis cDNA 서열을 얻었고 생물정보학적으로 분석한 결과, 이 서열은 부호화 영역이 240 bp이고 79개 아미노산을 부호화하였다. 다음으로 NCBI 데이터베이스에서 BLASTp 분석을 진행한 결과, 해당 서열이 용버들(Salix matsudana), 검은시나무(Populus trichocarpa)의 메탈로티오네인(metallothionein) MT2 서열과 비교적 높은 유사성을 가지고 있는 것으로 밝혀졌다. 또한, BamH I와 Xho I를 통하여, 클론하여 얻은 cDNA와 pBI121 플라스미드에 대한 효소 절단 및 연결을 진행하였으며, 아그로박테리움 매개 형질전환 방법(Agrobacterium-mediated method)을 사용하여 애기장대(Arabidopsis)에 도입하였다. Kana 방법에 따라 선별한 내성 유묘(resistant seedling)를 사용하여 유전체 DNA를 추출하였고, PCR 검정 방법을 통하여 6주(strain) 형질전환 균주를 얻었다. 다양한 스트레스에서 형질전환 애기장대 및 야생형 애기장대의 내성을 분석한 결과, 형질전환 애기장대는 NaCl, NaHCO 3 , H 2 O 2 , CuCl 2 , ZnCl 2 , CdCl 2 및 Sorbitol 스트레스 배양기에서 대조 그룹보다 더욱 강한 내성을 나타냈는데, 그중 CdCl 2 배양기에서 야생형 식물보다 더욱 강한 내성을 나타냈다. |
