저자(한글) |
SHI, Man-man,QIAO, Chang-cheng,ZHU, Ming,LI, Xue,LIU, Shan-shan |
초록 |
에티노플레네스(Actinoplanes) BCLP-016을 출발 균주로 하고 상온 실온의 플라즈마 돌연변이 유발(atmospherie and room temperature plasma, ARTP) 기술을 사용하여 이 균주의 포자를 처리하였다. 그리고 3개 서로 다른 시간에 각각 처리한 포자의 현탁액을 혼합하였다. 희석 코팅한 후, 균주의 균락 형태에 근거하여 부분적 단일 균락을 선택하여 초기 선별하였다. 발효 재선별을 통하여 라파마이신(Rapamycin) 고생산 균주 ARTP-039를 1주 얻었다. 해당 라파마이신의 생산량이 369.39mg/L에 달하며 출발 균주 BCLP-016의 생산량 256.86 mg/L보다 43.81% 향상하였다. ARTP-039 고생산 균주를 출발 균주로 사용하여 전통적인 자외선 돌연변이 유발 기술(UV mutagenesis)로 처리한 후 고, 중, 저 3종 치사율과 대응되는 시간에 포자의 현탁액을 처리하였다. 또한 리보솜 공학(Ribosome engineering) 이론에 근거하여 스트렙토마이신(streptomycin), 겐타마이신(gentamycin), 리팜피신(rifampicin), 클로람페니콜(chloramphenicol)과 에리트로마이신(Erythomycin) 등 5종 항성 물질을 선택하여 그 항성에 대한 초기 선별을 수행하였다. 발효 재선별 후, 최종 선별을 통하여 라파마이신 고생산 균주 St 8 +Gen 6 +Rif 9 +Chl 3 +Er 4 -015를 1주 얻었다. 이 균주는 5종 항성의 특징을 모두 나타냈다. 이 균주에 대한 진탕 실험 결과, 발효 7일 후 라파마이신의 생산량이 589.79 mg/L에 달하여 출발 균주 BCLP-016보다 129.61% 향상하였고, 그 유전 성능의 안정성이 양호한 것으로 확인되었다. |