| 초록 |
Gluconobacter melanogenus의 세포질과 세포막으로부터 NAD(P) 비요구성 폴리올 탈수소 효소를 분리하여 순차적으로 CM-셀롤로오즈의 통과, 풀리에칠렌 글리콜 침전, DEAE-Sephacel 컬럼의 통과, SP-5 PW 컬럼을 이용한 HPLC를 행하여 정제하였다. 정제된 효소는 소단위의 구조, 흡수 스펙트럼이 서로 같았고 기질특이성은 유사하였다. 이 효소는 시토크륨 C특유의 552, 522, 418 nm에서 흡수 피크를 갖는 흡수 스펙트럼을 보였다. 효소 중의 산화된 시토크롬 성분은 기질인 만니톨에 의하여 빠르게 환원되었다. 두 효소는 모두가 SDS-전기영동에 의하여 분자량이 63 K, 52 K, 20.5 K인 소단위로 구성되어 있음을 보였다. 그 중에서 분자량이 52 K인 소단위가 산화된 시토크롬 C와 같은 흡수 스펙트럼을 나타냈다. 이 효소는 제한된 기질특이성을 보였는데 D-lyxo 구조를 갖는 기질인 만니톨이나 솔비톨에 대하여만 효소활성을 보였으며 특히 만니톨에 대한 활성도가 컸다. |
