| 저자(한글) |
LI, Hong-yan,ZHOU, Zhi-ming,PAN, Qiang,YANG, Dong-mei,GU, Jin-fa,SHEN, Jia-ni,WANG, Shi-bing,ZHANG, Kang-jian |
| 초록 |
IL-24와 Smac는 암을 타켓으로 하는 다중 유전자(Multi gene) 치료 연구 과정에서의 주요한 후보 유전자이다. IL-24와 Smac 이중 유전자 발현 벡터를 구축하는 과정에서 안정적이고 고효율적인 연결 인자를 선택하는 것이 핵심이다. 3가지 다양한 연결 인자의 폴리펩타이드 서열(polypeptide sequence) IETD, EEED, F2A를 이용하여 3가지 진핵 발현 플라스미드 pcDNA3.1(+)- IL-24-IETD-Smac, pcDNA3.1(+)-IL-24-EEED-Smac, pcDNA3.1(+)IL-24-F2A-Smac를 구축하였으며 5- fluorouracil (5-FU)와 결합하여 여러 연결 인자로 유도한 융합단백질의 절단 효과에 대하여 연구하였다. 상술한 실험 결과에 의하면 3가지 IL-24-linker-Smac 이중 유전자 발현 벡터에서 F2A 연결 인자의 절단 효과가 가장 우수하며 caspase 활성과 정적(+) 상관관계가 있다. IETD, EEED 연결 인자로 유도한 융합 단백질은 일정하게 절단할 수 있지만 IETD/EEED 폴리펩타이드는 상류 IL-24 단백질의 반감기에 영향을 주고 IL-24 단백질의 폴리유비퀴틴화(ubiquitination) 분해를 가속화 한다. 본 연구는 암 치료에 응용할 수 있는 이중 유전자 혹은 다중 유전자 벡터를 구축하는데 설계 기준을 마련하였다. |
