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논문 기본정보
Expression of Fusion Protein ES-Kringle5 and Its Purification and Biological Analysis
논문 개요
| 기관명 | NDSL |
|---|---|
| 저널명 | 中國生物工程雜誌 = Journal of Chinese biotechnology |
| ISSN | 1671-8135, |
| ISBN |
논문저자 및 소속기관 정보
| 저자(한글) | CHEN, Yue,FU, Zhong-ping,LI, Jing-rong,YIN, Xiao-jin |
|---|---|
| 저자(영문) | |
| 소속기관 | |
| 소속기관(영문) | |
| 출판인 | |
| 간행물 번호 | |
| 발행연도 | 2014-01-01 |
| 초록 | 목적 : 유전 공학적 방법을 사용하여 재조합 융합 단백질 ES-Kringle5를 원핵 발현하고 정제한 다음 활성을 검사한다. 기법 : ES-Kringle5는 혈관내피 신생 억제인자(endostatin) N말단 앞부분의 27개 아미노산과 Kringle5를 펩타이드 링커(peptide linker)로 연결한 재조합 융합 단백질이다. 재조합 융합 단백질의 유전자 단편을 합성한 다음 pMD18-T에 삽입한다. 그 다음 대장균 발현 벡터 pET25b에 복제하고 대장균 BL21(DE3)을 형질전환한다. 젖당을 사용하여 유도 발현한 다음 Ni-NTA 친화성 크로마토그래피를 통해 정제하여 목표 단백질을 획득한다. HUVEC 세포 증식 억제 실험을 통해 생물학적 활성을 검사한다. 결과 : 재조합 플라스미드를 정확하게 구축하였다. 젖당 유도 발현 및 유도 온도를 낮추는 방법을 사용하여 목표 단백질의 생산량을 높이고 가용성 발현을 증가하였다. 정제한 재조합 단백질의 순도 95% 이상이었다. 생물학적 활성 검사 결과 본 재조합 단백질은 HUVEC 증식을 억제하는 기능이 있는 것으로 나타났다. 결론 : 생물학적 활성이 있는 재조합 단백질 ES-Kringle5는 대장균에서 고효율적으로 발현하였다. 본 연구는 ES-Kringle5의 체내 약효, 약물 대사, 안정성 평가 관련 연구에 토대를 마련하였다. |
| 원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART71005662 |
| 첨부파일 |
추가정보
| 과학기술표준분류 | |
|---|---|
| ICT 기술분류 | |
| DDC 분류 | |
| 주제어 (키워드) | Prokaryotic expression,Antiangiogenesis,Antitumor,Kringle5,Endostatin,원핵 발현,혈관 신생 억제,항종양,Kringle5,내피 신생 억제인자 |