| 저자(한글) |
WANG, Pengkai,LV?, Weiguang,HU, Xueyi,CHEN, Jinhui,SHI, Jisen |
| 초록 |
백합나무속 식물인 백합나무(Liriodendron tulipifera)의 현탁 세포와 조직 배양 묘목의 잎몸을 재료로 하고 백합나무 원형질체 분리, 순화 및 배양 조건을 연구하였다. 그 결과, 잎몸과 현탁세포를 0.1%인 2-모르폴린 에탄 술폰산(Morpholine ethanesulfonic acid, MES)과 0.6mol/L의 마니톨(mannitol)을 함유한 Cell Protoplast Wash(60M-CPW) 용액을 25℃의 조건에서 한 시간 동안 전처리하였을 때의 효과가 가장 좋았다. 최적의 현탁 세포 효소성 분해 용액은 60M-CPW+1% 셀룰라아제+헤미셀룰라아제(hemicellulase)+0.2% 펙타아제(pectolase)Y-24+0.1% MES였으며 그램(g) 당 재료가 25℃ 조건에서 6시간 효소 분해하였을 때의 원형질체 생산량은 3x10 6 개였다. 잎몸의 최적 효소성 분해 용액은 60M-CPW+2% 셀룰라아제+1% 헤미셀룰라아제+0.2% 펙타아제Y-23+0.1% MES였으며, 그램 당 재료를 25℃ 조건에서 10시간 효소 분해하였을 때의 원형질체 생산량은 11x10 6 개였다. 현탁 세포 원형질체는 배양이 쉬우며 KM8p+1.0mg/L 2, 4-D+0.5mg/L 6-BA 배지에서 25일 동안 배양하였을 때 육안으로 확인 가능한 캘러스(callus)를 형성하였다. |
