저자(한글) |
FANG, Pan,ZHANG, Yuncheng,YUAN, Huwei,LIU, Yulin,LI, Wei |
초록 |
본 논문은 장자송(Pinus sylvestris var. mongolica)의 SSR 최적 반응체계를 구축하기 위해 DNA 템플릿(DNA template), Taq 효소 함량, dNTP 농도, 프라이머(primer) 농도, 어닐링 온도(annealing temperature), 순환 횟수 등 6개 요인에 대하여 단일요인 다수준 실험(single factor tests with multi-level)을 진행하여 밴드(band)의 밝기와 선명도를 관찰하였다. 그리고 L16(45) 직교배열 실험(orthogonal test)을 이용하여 DNA 템플릿 농도, Taq 효소 함량, dNTP 농도, 프라이머 농도 등 4개 요인을 4개 수준에서 최적화하였다. 구축한 장자송 SSR 최적 반응체계 25 mu;L에는 DNA 템플릿 50ng, Taq 효소 1.0U, dNTP 0.3mmol/L, 프라이머 0.15 mu;mol/L, 10×Taq Buffer(Mg 2+ 함유) 2.5 mu;L가 함유되어 있다. 장자송 SSR 반응체계의 최적화는 장자송 SSR 분자마커의 연구에 도움이 되며, 또한 장자송 천연군락과 인공군락의 유전 다양성 분석과 유전자 지도(genetic map) 및 위치결정 기능 유전자의 구축을 위한 기초를 마련하였다. |