저자(한글) |
WU, Zheng-qian,LI, Xue-hu,LIANG, Jian-ping,LU, Xi-hong,XIN, Zhi-jun,ZHOU, Xiang |
초록 |
본 논문에서는 대청엽(Isatis indigotica Fort) SRAP-PCR 증폭 시스템을 구축하고 최적화하는 것을 목적으로 하였다. 대청엽 유전체 DNA를 템플릿으로, 직교실험 설계를 통하여 Mg 2+ , dNTP, 프라이머, Taq DNA 중합효소와 템플릿 DNA 등 5가지 요소 5개 수준으로부터 대청엽 SRAP-PCR 반응 시스템에 대해 최적화하였다. 구축한 대청엽 SRAP-PCR 최적 반응 시스템은 25 μL 반응 시스템에 1.5 mmol·L -1 Mg 2+ , 0.15 mmol·L -1 dNTPs, 0.60 μmol·L -1 프라이머, 2.0 U Taq DNA 중합효소와 26 ng DNA 템플릿을 포함한 것이다. 해당 시스템 조건에서 서로 다른 대청엽 재료의 PCR 증폭과 서로 다른 프라이머 조합에서 모두 해당 시스템이 안정적이고 신뢰적이며 대청엽 SRAP 분자 마커에 적합하다는 것을 증명하였다. 이 시스템의 구축은 향후 SRAP-PCR 분자 마커 기술로 대청엽 분자 유전학 연구를 추진하는데 기초를 마련하였다. |