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논문 기본정보
Establishment of a transgenic zebrafish model with tetracycline-induced GFP expression in the liver
논문 개요
| 기관명 | NDSL |
|---|---|
| 저널명 | 中國實驗動物學報 = Acta laboratorium animalis scientia sinica |
| ISSN | 1005-4847, |
| ISBN |
논문저자 및 소속기관 정보
| 저자(한글) | ZHANG, Li,LIU, Chao,ZHOU, Xin,XIE, Ying,LIU, Shu-feng,XU, Zeng-nian |
|---|---|
| 저자(영문) | |
| 소속기관 | |
| 소속기관(영문) | |
| 출판인 | |
| 간행물 번호 | |
| 발행연도 | 2015-01-01 |
| 초록 | 목적: 제브라피쉬 체내에서 tet-on 테트라사이클린 유도 발현 시스템의 응용 방법 및 기술 노선을 연구한다. 테트라사이클린으로 유도한 간 특이적 발현 녹색 형광단백질 형질전환 제브라피쉬 모델을 구축한다. 조건적 기능 유전자 연구 그리고 조직 특이적 형질전환 제브라피쉬 질병 모델 구축에 기초를 마련하기 위한 것이다. 기법: 간 특이적 프로모터 fabp10에 의해 rtTA 단백질이 발현되는 재조합 플라스미드 pfabp10-rtTA를 구축한다. pTRE-Tight-BI-AcGFP1 플라스미드와 연합하여 HeLa 세포를 형질전환한 다음 doxycycline으로 유도한다. 그리고 웨스턴 블롯(Western blot) 방법으로 검증한다. pfabp10-rtTA와 pTRE-Tight-BI-AcGFP1 연합 플라스미드를 제브라피쉬의 1-세포기(1-cell stage) 수정란에 주사한 후 30μg/mL doxycycline으로 유도한다. 그 다음 형광 선별을 통해 안정적인 접합체를 획득한다. 결과: pfabp10-rtTA와 pTRE-Tight-BI-AcGFP1로 공동 형질전환한 HeLa 세포를 1μg/mL 농도의 doxycycline 배양액으로 유도한 결과, GFP 발현량은 doxycycline 배양액을 첨가하지 않은 대조 그룹에 비해 뚜렷이 높았다. 안정적으로 형질전환된 제브라피쉬 치어를 선별 획득하였다. 30μg/mL 농도의 doxycycline에서 제브라피쉬 치어 간은 뚜렷한 녹색 형광을 나타냈고 대조 그룹 치어의 상응하는 간 부위에서 뚜렷한 녹색 형광을 발견하지 못했다. 결론: tet-on 테트라사이클린 유도 발현 시스템은 테트라사이클린으로 유도한 제브라피쉬 간 특이적 발현의 외인성 유전자를 구축하는데 사용 가능하였다. 본 기술을 사용하여 간 발현 GFP 형질전환 제브라피쉬 계통을 유도 구축할 수 있었다. 본 연구는 조건적 형질전환 제브라피쉬 질병 모델을 구축하고 간 기관의 발생, 발육 등을 연구하는데 좋은 동물 모델을 제공하였다. |
| 원문URL | http://click.ndsl.kr/servlet/OpenAPIDetailView?keyValue=03553784&target=NART&cn=NART75841879 |
| 첨부파일 |
추가정보
| 과학기술표준분류 | |
|---|---|
| ICT 기술분류 | |
| DDC 분류 | |
| 주제어 (키워드) | Zebrafish,Tetracycline-inducible expression system,Liver,Green fluorescence protein,제브라피쉬,테트라사이클린 유도 발현 시스템,간,녹색 형광단백질 |