| 저자(한글) |
YIN, You-Ping,LI, Jia,LIN, Ya-Yu,CHEN, Shi-Wei,WANG, Zhong-Kang |
| 초록 |
[목적] 황룡병(Huanglongbing, HLB)의 발생률이 높은 지역에 있는 무라야 파니굴라타(Murraya paniculata) 식물체 잎과 줄기에서 내생세균(bacterial strains)을 분석하고, 감귤그린병(Citrus huanglongbing)에 저항할 수 있는 내생세균을 찾는데 기반을 둔다. [기법] 평판 배양법과 16S rDNA 기반의 제한효소 단편 다형성(Restriction fragment length polymorphism, RFLP) 서열 분자 감정법을 이용하여 무라야 파니굴라타 식물의 내생세균에 대해 다양성 분석을 진행하였다. [결과] 통성혐기성(facultative anaerobe) 생장환경에서, 무라야 파니굴라타(Murraya paniculata) 식물체로부터 분리하여 얻은 26주(plant)의 배양 가능한 내생세균은 각각 9개 세균속의 14종에 속한다. 그 중에서 엔테로박터 속(Enterobacter sp.)(IF=19.23%),바실러스균 속(Bacillus sp.)(IF=38.46%)은 무라야 파니굴라타의 배양 가능한 내생세균의 우세한 균속에 속한다. 줄기에서의 내생세균 풍부도(abundance)는 잎보다 높았다. 본 연구에서는 또 무라야 파니굴라타 내생세균 16S rDNA 라이브러리(library)를 구축하고, 라이브러리 품질에 대해 검측하였다. 그 결과, 본 클론 라이브러리의 커버리지(Coverage C)는 94.97%이며, Rarefaction 곡선과 결합하여 분석한 결과, 구축한 클론 라이브러리는 상대적으로 충분하다는 것을 나타냈다. 또한 라이브러리 중의 179개 양성 클론에 대해, HaeШ, MspⅠ, RsaⅠ 등 3가지 제한효소를 분석하여 20개의 서로 다른 작전 분류학 단위(Operational taxonomic units, OTUs)를 얻었는데, 그 중에서 세라티아 속(Serratia sp.)은 무라야 파니굴라타 식물체 내생세균의 절대적인 우세 균속에 속하였다. 따라서 14주 내생세균의 기능을 측정하였는데 그 중에서 9주 균은 인돌-3-아세트산(Indole -3- acetic acid, IAA)을 생성할 수 있으며, 4주 균은 항생소(phlD) 합성 능력을, nifH와 NFb를 결합한 질소고정 배양기에서는 3주 균이 질소고정 능력을, 1주 균은 아미노시클로프로판-1-카르복실산 (1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid, ACC) 합성 능력을, 8주 균은 철세포 합성능력을, 3주 균은 전분가수분해 능력을, 2주 균은 강한 양성 단백질효소 합성능력을 나타내며, 4주 균은 위의 4가지 기능을 모두 나타냈다. [결론] 무라야 파니굴라타 식물체에서 내생세균은 풍부한 다양성을 갖고 있으며, 무라야 파니굴라타 식물체 생장발육, 항생물, 비생물학적 스트레스에 대해서는 중요한 생리적 기능이 있다는 것을 알 수 있다. |
