| 저자(한글) |
JIANG, Yan-ran,ZHANG, Yi-chen,LIU, Yi-chen,GENG, Xu-yun,SUN, Jin-sheng |
| 초록 |
β-노다바이러스(Betanodavirus)는 교정 기능이 결핍한 중합효소를 이용하여 유전체 복제를 진행하며 쉽게 돌연변이를 초래한다. 따라서 광범위한 숙주 감염성을 가지며 치사율이 극히 높은 바이러스성 신경 괴사를 유발하기 때문에 검측과 방어 방법을 연구해야 한다. 본 연구는 넙치(Paralichthys olivaceus)의 β-노다바이러스를 대상으로 프라이머 설계를 이용하고, His 마커 코딩 서열을 완전한 바이러스 외피 단백질의 C 말단에 연결하여 원핵 발현 벡터를 구축하였다. 또한, SDS-PAGE와 질량 스펙트럼을 이용하여 발현 산물에 대한 분리와 감정을 진행하고, 재조합 외피 단백질에 대한 니켈(nickel) 입자 친화성 칼럼 정화를 거친 후 리폴딩 조건(refolding conditions)에 대한 교정 최적화를 진행하였다. 그 결과, 4개의 펩타이드 세그멘트(peptide segments)는 질량 스펙트럼 감정 결과, 예측과 일치했다. 정제된 생성물량은 36mg/L에 도달했고, 4°C 조건에서 리폴딩 완충액(refolding buffer) 중의 요소(urea)와 PBS의 최적 농도는 0.8mol/L과 0.05mol/L였다. 본 연구 결과는 관련 백신과 상기 바이러스를 신속하게 검측하는 제품을 개발하기 위한 이론적 근거를 제공하였다. |
